水蛭素對特發(fā)性肺間質纖維化大鼠肺組織中纖溶酶原抑制劑-1(PAI-1)mRNA及蛋白表達的干預研究.pdf

1、目的：觀察水蛭素干預IPF大鼠肺組織中PAI-1mRNA及蛋白表達的作用，探討水蛭素干預大鼠IPF的作用機制。
　　方法：選取180只SPF級同月齡健康的Wistar大鼠，隨機數(shù)字表法抽取18只大鼠作為空白（K）組，剩余162只大鼠氣管內注射博萊霉素統(tǒng)一造模，造模成功后隨機選取108只分為模型（M）組、激素（J）組、水蛭素高劑量（G）組、中劑量（Z）組、低劑量（D）組、水蛭素中劑量聯(lián)合激素（ZJ）組，每組18只，造模后第2天開始給

2、藥，觀察大鼠的一般情況，分別在造模后7天、14天、28天處死大鼠并收集標本，觀察大鼠肺組織形態(tài)學及病理學變化，采用Western blot法檢測大鼠肺組織中PAI-1的蛋白表達，RT-qPCR法檢測PAI-1的基因表達。
　　結果：
　　1.大鼠一般情況：M組大鼠一般情況最差，且逐漸惡化，表現(xiàn)為大鼠精神狀態(tài)越來越差，活動量、飲食量日益減少，呼吸頻率加快，皮毛無光澤，第28天大鼠出現(xiàn)豎毛。所有處理組中，ZJ組大鼠一般情況最好，

3、且呈逐漸好轉趨勢。D組大鼠整體狀態(tài)僅僅次于M，且日益變差。G組、Z組、J組大鼠一般狀況彼此之間相差不大，總體來看，處于逐漸好轉的趨勢。
　　2.大鼠體重變化：在7天、14天、28天，與K組比較，各組大鼠體重均不同程度減?。≒＜0.01）。M組體重最?。≒＜0.01）。ZJ組體重與G組大鼠體重相當（P＞0.05），且顯著大于Z組和D組（P＜0.01），Z組和D組相當（P＞0.05）。
　　3.大鼠肺組織外觀形態(tài)觀察：7dJ組和

4、水蛭素組變化與M組肉眼觀無明顯差別，肺組織出現(xiàn)輕度充血、水腫，存在散在瘀點，色澤不一致，彈性尚可。14d時水蛭素G組、ZJ組肺組織整體形態(tài)明顯優(yōu)于同期J組和水蛭素Z組、D組，同期的J組可見瘀點、瘀斑成片，局部組織實變，實變組織顏色變成暗紅、彈性不佳，質地變韌。28d時水蛭素G組、ZJ組肺組織形態(tài)接近于K組，有散在的針尖大小的瘀點，肺組織輪廓飽滿，彈性、質地尚可，J組、D組、Z組外觀比同期M組稍好，但明顯較同期的G組和ZJ組差。
　

5、　4.大鼠肺組織損傷評分與肺纖維化評分：7天、14天、28天與K組比較，各組大鼠肺組織纖維化評分均顯著增高（ P＜0.01）。M組大鼠肺組織損傷評分和肺纖維化評分均最高（P＜0.01），ZJ組評分均最低（P＜0.01），與G組相當（P＞0.05），且顯著低于J組、Z組和D組（P＞0.05），而J組明顯低于Z組和D組（P＜0.01），Z組與D組相當（P＞0.05）。
　　5.PAI-1基因和蛋白的表達結果：不同時間點，M組大鼠肺組織

6、PAI-1基因和蛋白表達均最強（P＜0.01），而且隨著時間的推移表達強度逐漸增強，說明肺纖維化處于發(fā)展趨勢，28天大鼠肺間質纖維化程度最重。各用藥組進行比較發(fā)現(xiàn)：在7天、14天、28天，ZJ組大鼠肺組織PAI-1基因和蛋白表達均最弱（P＜0.01），G組次之（P＜0.01），J組表達僅次于G組（P＜0.01）， J組表達顯著低于Z組和D組（P＜0.01），而Z組和D組相當（P＞0.05）。
　　結論：水蛭素通過降低PAI-1基因