鐵皮石斛水提物對(duì)糖尿病小鼠血糖和腸道菌群的影響.pdf

1、目的：研究人工培育的鐵皮石斛水提取物，對(duì)鏈脲霉素（STZ）所致的高血糖小鼠血糖、血脂、機(jī)體的脂肪和肌肉組織成分比例和肝臟抗氧化能力的影響，分析對(duì)腸道菌群影響。通過(guò)多種途徑分析高血糖對(duì)機(jī)體的影響，以及鐵皮石斛水提物對(duì)機(jī)體的保護(hù)作用和可能的機(jī)制。
　　方法：腹腔注射 STZ，制備小鼠糖尿病模型。實(shí)驗(yàn)分為鐵皮石斛水提物高、中、低劑量組、正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽(yáng)性藥物組。觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的一般情況，記錄小鼠體重，用核磁共振儀測(cè)定小鼠機(jī)體組織

2、成分比例，用血糖試紙測(cè)空腹血糖值，血清 TC、TG、HDL值按照試劑盒說(shuō)明檢測(cè)，利用分光光度計(jì)測(cè)肝臟SOD含量（黃嘌呤氧化酶法）、TBA法測(cè)MDA含量，通過(guò)PCR-DGGE凝膠電泳，quantity one軟件分析小鼠腸道菌群多樣性。
　　結(jié)果：（1）正常對(duì)照組小鼠在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，生長(zhǎng)情況良好，沒(méi)有死亡現(xiàn)象。成模小鼠精神不振、反應(yīng)慢、不愛(ài)活動(dòng)，每日喝水量增加，排尿次數(shù)明顯增加、體重明顯下降（P<0.05）、毛發(fā)松馳無(wú)光澤、好激怒

3、、糞便變小，變黃且發(fā)干，模型對(duì)照組存活狀態(tài)最差，存活率僅為50%。石斛水提物三個(gè)劑量組和陽(yáng)性藥物組小鼠的一般狀態(tài)均明顯改善，毛色和精神狀態(tài)有所恢復(fù)，飲水量和尿量減少，糞便著色變深，存活率分別為80%、60%、60%、80%。模型對(duì)照組機(jī)體脂肪與肌肉的比例：正常對(duì)照組小鼠，隨體重的增加，脂肪組織明顯增加，明顯高于其他各組，脂肪組織所占比例＞肌肉組織。模型對(duì)照組小鼠，隨體重的下降，脂肪組織也減少，與其他各組相比有很大差別，脂肪組織所占比例＜

4、肌肉組織。石斛水提物三個(gè)劑量組及陽(yáng)性藥物組，脂肪組織的變化與體重的變化一致，不論是脂肪組織的占比例還是肌肉組織所占比例均高于模型組，并且肌肉組織所占比例高于正常對(duì)照組。（2）與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組血糖水平顯著上升，在建模第28d后開(kāi)始下降，3個(gè)石斛水提物組血糖水平在第7d起與模型對(duì)照組比有所減少，14~28d減少更加明顯，差異有顯著性（P<0.01），這一結(jié)果與陽(yáng)性藥物組的血糖的變化一致，并且各組彼此沒(méi)有顯著差異（P>0.05）。

5、（3）建模28d后，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠血清TC、TG含量明顯高于正常對(duì)照組小鼠（P<0.05），HDL低于正常對(duì)照組（P<0.05）。與模型對(duì)照組比較，石斛水提物三個(gè)劑量組和陽(yáng)性藥物組的血清TC含量明顯減少（P<0.05），HDL含量明顯增加（P<0.05）。石斛低劑量組、陽(yáng)性藥物組TG含量低于模型對(duì)照組（P<0.05），石斛中、高劑量組的血清TG含量高于模型對(duì)照組（P<0.05）。（4）與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠肝

6、組織SOD活性顯著降低（P<0.05），MDA水平顯著上升（P<0.01）。與模型對(duì)照組比，三個(gè)劑量石斛水提物的肝組織 SOD活性均明顯升高、MDA含量均減少（P<0.05）；陽(yáng)性藥物組SOD活力有所增加（P<0.05），但是MDA含量高于模型對(duì)照組小鼠。（5）與正常對(duì)照組比較，陽(yáng)性藥物組和模型對(duì)照組糞便中菌群條帶模糊不清，細(xì)菌表達(dá)量較低。石斛水提物中、高劑量組菌群多樣性好且表達(dá)量較高。聚類分析結(jié)果表明，石斛水提物低、中劑量組為一簇，菌

7、群相似度最高，石斛高劑量組、模型對(duì)照組，陽(yáng)性藥物組和正常對(duì)照組為一簇，菌群相似度高，其中陽(yáng)性藥物組與正常對(duì)照組菌群高度相似，石斛水提物治療組中以高劑量組的菌群與正常對(duì)照組最為相似。以上結(jié)果表明，鐵皮石斛水提物中、高劑量均能改善糖尿病小鼠的腸道菌群數(shù)量和多樣性，在提高菌群數(shù)量上比陽(yáng)性藥物作用效果好。
　　結(jié)論：（1）石斛水提物能夠改善糖尿病小鼠機(jī)體的健康情況和體重急劇下降的并發(fā)癥；（2）石斛水提物對(duì)STZ誘導(dǎo)的糖尿病小鼠有顯著的降血

8、糖功效，和陽(yáng)性藥物（鹽酸二甲基雙胍）效果相差不多；（3）石斛水提物能調(diào)節(jié)STZ糖尿病小鼠機(jī)體脂肪與肌肉組織的比例，提示其可能調(diào)節(jié)了機(jī)體脂代謝，從而影響血糖水平；（4）石斛水提物能夠調(diào)節(jié)糖尿病導(dǎo)致的TC、TG升高、HDL降低，改善糖尿病小鼠的血脂混亂；（5）石斛水提物能夠通過(guò)升高糖尿病小鼠肝組織SOD活性、降低MDA水平，來(lái)增強(qiáng)肝臟抗氧化能力；（5）石斛水提物能夠調(diào)節(jié)糖尿病所導(dǎo)致小鼠腸道菌群失調(diào)、菌群數(shù)量減少。綜上所述，鐵皮石斛水提物通過(guò)