鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)對(duì)不同發(fā)育期大腦的影響及其相關(guān)機(jī)制研究.pdf

1、本文對(duì)鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）對(duì)不同發(fā)育期大腦的影響及其相關(guān)機(jī)制進(jìn)行了研究。包括三個(gè)部分：
　　 第一部分：
　　 目的：研究鄰苯二甲酸二丁酯(Di-n-buty1pHthalate,DBP)對(duì)F1代Wistar鼠的生長(zhǎng),神經(jīng)行為發(fā)育和海馬組織形態(tài)學(xué)的影響。
　　 方法：成年F0代雌性Wistar大鼠80只,隨機(jī)分為對(duì)照組和三個(gè)染毒劑量實(shí)驗(yàn)組,每組20只,雌鼠性成熟后與健康成年雄鼠交配,確認(rèn)配對(duì)成功后予F0代雌

2、鼠DBP灌胃染毒,染毒時(shí)間從受孕第6天開(kāi)始持續(xù)到產(chǎn)后第22天,實(shí)驗(yàn)組DBP染毒劑量分別為100mg.kg-1.d-1(低劑量組)、500mg.kg-1.d-1(中劑量組)、1000mg.kg-1.d-1(高劑量組)。對(duì)照組予同等劑量的玉米油灌胃。染毒期間觀察F0代雌鼠和F1代幼鼠的生長(zhǎng)發(fā)育情況,測(cè)量體重與腦重變化,Morris水迷宮測(cè)定F1代幼鼠空間學(xué)習(xí)和記憶能力,HE染色觀察F1代幼鼠海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。
　　 結(jié)果：(

3、1)20只高劑量染毒組F0代孕鼠中18只死亡,僅有2只產(chǎn)仔；(2)中劑量染毒組雄性F1代幼鼠生后第7天的體重與同性別對(duì)照組相比有降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；(3)中劑量染毒組F1代幼鼠生后第7天的腦重與同性別對(duì)照組相比較均有不同程度降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,P<0.05)；中劑量染毒組雄性F1代幼鼠生后第7天的腦重與同性別低劑量組相比也有降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；中劑量染毒組雄性F1代幼鼠生后第14

4、天的腦重與同性別對(duì)照組和低劑量組相比較也有降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,P<0.05)；中劑量染毒組雄性F1代幼鼠生后第22天的腦重與同性別對(duì)照組相比較有降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；(4)隨著訓(xùn)練時(shí)間的延長(zhǎng),各組實(shí)驗(yàn)大鼠均獲得了一定的學(xué)習(xí)和記憶能力。在定位航行實(shí)驗(yàn)的四天中,中劑量染毒組雄性F1代幼鼠的潛伏期與對(duì)照組相比有延長(zhǎng),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),在定位航行實(shí)驗(yàn)的后三天,中劑量染毒組雄性F1代幼鼠的潛伏期

5、與低劑量組相比較也有延長(zhǎng),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01；P<0.01；P<0.05)。中劑量染毒組雄性F1代幼鼠第三天的潛伏期與同劑量雌性后代相比有延長(zhǎng),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。低劑量染毒組雌性F1代幼鼠的潛伏期在定位航行實(shí)驗(yàn)的第2天及第3天與同性別對(duì)照組相比也有延長(zhǎng),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05；P<0.05)。在訓(xùn)練的第5天,中劑量組F1代幼鼠尋臺(tái)次數(shù)少于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001,P<0.01),中劑量

6、組雄性F1代幼鼠的尋臺(tái)次數(shù)與低劑量組同性別后代比較有減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與同性別對(duì)照組比較,低劑量組雄性F1代幼鼠的尋臺(tái)次數(shù)也減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；(5)停止給藥時(shí),中劑量染毒組雄性F1代幼鼠海馬各區(qū)神經(jīng)細(xì)胞變性明顯,細(xì)胞失去完整的形態(tài),排列紊亂,細(xì)胞核濃染,邊集,甚至死亡,與對(duì)照組相比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001),隨停藥時(shí)間的延長(zhǎng),部分海馬有一定程度的恢復(fù),但與對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

7、義(P<0.001)。
　　 結(jié)論：500mg.kg-1.d-1的DBP在胚胎期和哺乳期持續(xù)染毒后對(duì)F1代Wistar鼠早期生長(zhǎng),神經(jīng)行為發(fā)育和海馬形態(tài)學(xué)能夠產(chǎn)生明顯的影響。
　　 第二部分：
　　 目的：研究鄰苯二甲酸二丁酯(Di-n-buty1pHthalate,DBP)對(duì)F1代Wistar鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞膜電位和線粒體Na+-K+-ATP酶活性的影響。
　　 方法：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染毒劑量以及分組同第一部分。

8、產(chǎn)后第14天用膜片鉗和分光光度法測(cè)F1代幼鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞膜電位和線粒體Na+-K+-ATP酶活性。
　　 結(jié)果：(1)隨DBP劑量的增加,海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞線粒體Na+-K+-ATP酶活性和膜電位均逐漸下降。(2)中劑量染毒后,F1代仔鼠Na+-K+-ATP酶活性均低于相應(yīng)對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01,P<0.05),中劑量染毒組F1代雌性仔鼠Na+-K+-ATP酶活性也低于同性別低劑量染毒組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0

9、5)。(3)DBP中劑量和高劑量染毒后F1代膜電位均顯著低于相同性別對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001,P<0.001);與低劑量染毒組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001,P<0.001)。
　　 結(jié)論：500mg.kg-1.d-1的DBP在胚胎期和哺乳期持續(xù)染毒后能夠通過(guò)能量代謝途徑明顯影響F1代雌性和雄性大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞發(fā)育。
　　 第三部分：
　　 目的：研究鄰苯二甲酸二丁酯對(duì)F1代幼鼠血清性激素

10、水平的影響。
　　 方法：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染毒劑量以及分組與第一部分相同。在產(chǎn)后第14天用化學(xué)發(fā)光酶免疫測(cè)定法測(cè)定F1代仔鼠血清性激素水平。
　　 結(jié)果：中劑量染毒后F1代雌性和雄性仔鼠的雌二醇水平均低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001,P<0.05),中等劑量染毒后F1代雌性仔鼠的雌二醇水平與低劑量染毒組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；與對(duì)照組比較,F1代雄性仔鼠的睪酮升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。<