放射性 125I粒子植入治療人肺腺癌裸鼠移植瘤的有效性研究.pdf

1、目的：以人肺腺癌細胞A549裸鼠皮下移植瘤為模型，觀察不同活度的放射性125I粒子對腫瘤組織的抑瘤作用，觀察腫瘤組織病理、腫瘤細胞凋亡及增殖，進一步探討放射性125I粒子植入對人肺腺癌裸鼠移植瘤微血管生成的影響及其作用機制，為臨床應用治療腫瘤奠定理論基礎。
　　方法：制備人肺腺癌細胞A549裸鼠皮下移植瘤模型40只，采用隨機數(shù)字表法分為4組，每組10只，0MBq組、22.2 MBq組、29.6 MBq組和對照組。用18 G植入針在

2、各組裸鼠瘤體內分別植入放射活度為0、22.2和29.6 MBq125I粒子，每個移植瘤內植入粒子1枚，對照組不予處理。植入粒子后每2天觀察腫瘤生長狀況，每4天定時用游標卡尺測量腫瘤大小，按照公式V=L×W2/2(L:最長徑，W:與L相垂直的橫徑)計算腫瘤體積。粒子植入30d后處死裸鼠，繪制腫瘤生長曲線。剝取瘤體分別進行以下檢測：（1）常規(guī)蘇木素-伊紅(HE)染色觀察腫瘤組織病理學變化；（2）采用脫氧核苷酸末端轉移酶(TdT)介導的 dU

3、TP缺口末端標記方法(Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling，TUNEL)檢測腫瘤細胞凋亡；（3）免疫組織化學S-P法檢測腫瘤組織核增殖相關抗原Ki-67的表達及微血管密度（microvascular density,MVD）；（4）采用實時熒光定量RT-PCR法檢測腫瘤組織血管內皮生長因子(vascular endothelial growth fact

4、or,VEGF)和缺氧誘導因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）mRNA的表達；（5）采用蛋白質印跡Western blot法檢測腫瘤組織VEGF和HIF-1α蛋白的表達。
　　結果：（1）治療結束后22.2 MBq組、29.6MBq組瘤體積遠小于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；0 MBq組與對照組瘤體積相比差異均無統(tǒng)計學意義，22.2MBq組與29.6 MBq組瘤體積相比差異

5、均無統(tǒng)計學意義（均P＞0.05）。（2）HE染色病理切片顯示，22.2MBq組與29.6 MBq組腫瘤組織出現(xiàn)大量變性壞死的細胞，0 MBq組與對照組腫瘤組織癌細胞排列緊密，細胞核大深染。（3）TUENL法檢查發(fā)現(xiàn)22.2 MBq組與29.6 MBq組瘤組織的凋亡指數(shù)均明顯增高，與對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；0 MBq組與對照組、22.2 MBq組與29.6 MBq組的凋亡指數(shù)差異均無統(tǒng)計學意義(均P＞0.05)。（4）

6、免疫組織化學S-P法發(fā)現(xiàn)：22.2 MBq組、29.6 MBq組的Ki-67表達與對照組比較明顯降低（P＜0.05），0 MBq組與對照組、22.2MBq組與29.6MBq組Ki-67表達相比差異均無統(tǒng)計學意義(均P＞0.05)；22.2 MBq組、29.6 MBq組的MVD與對照組比較明顯降低（P＜0.05），0 MBq組與對照組、22.2MBq組與29.6MBq組MVD相比差異均無統(tǒng)計學意義(均P＞0.05)。（5）RT-PCR檢測

7、表明，22.2 MBq組和29.6 MBq組mRNA相對表達量均低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；0 MBq組與對照組，22.2 MBq組與29.6 MBq組的VEGF和HIF-1α的mRNA表達差異均無統(tǒng)計學意義(均P＞0.05)。（6）Western blot結果顯示，22.2 MBq組與29.6 MBq組瘤組織VEGF和HIF-1α蛋白表達均明顯減少，與對照組相比差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），0 MBq組與對照組以