海參多糖抗肺癌活性及對(duì)T細(xì)胞免疫功能調(diào)節(jié)研究.pdf

1、目的：通過(guò)海參多糖與人體PBMC體外培養(yǎng)，檢測(cè)T細(xì)胞表面CD2、CD28分子的表達(dá)，為海參多糖的進(jìn)一步應(yīng)用提供可靠的科學(xué)依據(jù)，為開(kāi)發(fā)海洋藥物提供理論指導(dǎo)。
　　方法：（1）收集西海岸醫(yī)院呼吸、腫瘤科2013年12月~2014年6月間的30例肺癌患者，以30例健康體檢者作為對(duì)照。抽取受檢者早晨空腹肘靜脈血4ml，PBS對(duì)倍稀釋，離心，提取PBMC，分別與不同濃度的海參多糖和含10％胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液培養(yǎng)。
　　

2、（2）提取肺癌患者外周血PBMC，分別設(shè)空白組、不加藥組、加藥組，監(jiān)測(cè)不同濃度的海參多糖對(duì)細(xì)胞活力及OD值。
　?。?）海參多糖與健康體檢者PBMC體外培養(yǎng)，對(duì)T細(xì)胞表面CD2和CD28分子表達(dá)的影響。
　?。?）采用流式細(xì)胞儀分別檢測(cè)健康人群與肺癌患者的外周血中CD8+CD28+T細(xì)胞、CD8+CD28-T細(xì)胞的表達(dá)程度。
　　（5）海參多糖與肺癌患者外周血PBMC體外培養(yǎng)，在體外培養(yǎng)前、后分別檢測(cè)CD2和CD28分

3、子表達(dá)。
　　結(jié)果：（1）不同濃度的海參多糖對(duì)人體外周血PBMC體外生長(zhǎng)狀態(tài)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)以0.1、1、10、50、100μg·mL-1體外培養(yǎng)，隨著濃度增加，細(xì)胞聚集越明顯，達(dá)到一定的濃度后聚集效果不再增加；而沒(méi)有添加海參多糖的PBMC細(xì)胞培養(yǎng)后，沒(méi)有發(fā)生明顯的聚集現(xiàn)象。以10、50μg·mL-1培養(yǎng)最明顯。
　　（2）2小時(shí)開(kāi)始出現(xiàn)PBMC增殖現(xiàn)象，隨著時(shí)間延長(zhǎng)，聚集越來(lái)越明顯，以24小時(shí)最明顯。
　?。?）海參

4、多糖與健康人群外周血PBMC體外培養(yǎng)前后，CD2和CD28表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=2.42~6.51，p<0.05)。
　　（4）肺癌患者外周血中CD8+CD28+T細(xì)胞表達(dá)差異性具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=4.27，p<0.001）；CD8+CD28-T細(xì)胞表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=4.31，p<0.001）。
　?。?）海參多糖與肺癌患者PBMC體外培養(yǎng)，T細(xì)胞表面CD2分子表達(dá)培養(yǎng)前、后有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（t=4.29，p<0.

5、001），而CD28分子表達(dá)也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（t=2.23，p<0.05）。
　　結(jié)論：海參多糖在一定濃度范圍內(nèi)能增加外周血PBMC的增殖，24小時(shí)最明顯；海參多糖可以調(diào)節(jié)外周血中T細(xì)胞表面的CD2、CD28分子的表達(dá)，表明海參多糖可以促進(jìn)T細(xì)胞的免疫功能調(diào)節(jié)，可以改善機(jī)體的細(xì)胞免疫功能；肺癌患者外周血中CD8+CD28-T細(xì)胞顯著升高，而CD8+CD28+T細(xì)胞明顯下降，提示腫瘤患者T細(xì)胞活化功能低下，可能導(dǎo)致腫瘤的逃逸。海參多