成纖維細(xì)胞生長因子抑制劑BGJ398對(duì)腎癌增殖、粘附和侵襲功能的相關(guān)研究.pdf

1、本課題主要是通過細(xì)胞藥物實(shí)驗(yàn)明確成纖維細(xì)胞生長因子抑制劑對(duì)腎癌細(xì)胞的腎癌增殖、粘附和侵襲功能影響，從而為治療腎癌提供新的治療方法。腎細(xì)胞癌(renal cell carcinoma，RCC)是最常見的一種腎惡性腫瘤類型，發(fā)病率約占人類惡性腫瘤的3％，在泌尿系惡性腫瘤中占第二位。成纖維細(xì)胞生長因子（fibroblast growth factor FGF）是生長因子超家族的一員，其主要發(fā)揮組織修復(fù)、促進(jìn)血管生成、骨骼形成、胚胎發(fā)育等重要作

2、用，可能與腫瘤的分化、浸潤、生長、轉(zhuǎn)移等有關(guān);且多項(xiàng)研究認(rèn)為腫瘤患者血液中FGFSs水平升高，并有研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤患者血液中FGFs水平越高，其惡性程度越高[29]。由于腫瘤細(xì)胞可增強(qiáng)表達(dá)FGF基因，通過旁分泌分泌FGFs，促進(jìn)腫瘤血管新生，增加腫瘤組織的血應(yīng)，促進(jìn)腫瘤的生長;且腫瘤細(xì)胞本身FGF受體可有過表達(dá)，通過自分泌方式可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長，因此阻斷FGF信號(hào)傳導(dǎo)途徑至少在減少血管生成一方面可以抑制腫瘤生長。早在1991年K Fuj

3、imoto等研究發(fā)現(xiàn)腎癌患者血清中FGF水平明顯增高，其水平與腫瘤分期及進(jìn)展情況相關(guān);I Tsimafeyeu等研究發(fā)現(xiàn)RCC細(xì)胞表面中成纖維細(xì)胞生長因子(fibroblast growth factor receptor，F(xiàn)GFR)FGFR1、FGFR2過度表達(dá);而正常腎細(xì)胞表面FGFR1表達(dá)少于2.2％，F(xiàn)GFR2不表達(dá)。國內(nèi)有也有多位學(xué)者針對(duì)RCC細(xì)胞表面FGFR相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)了FGFR的過表達(dá)。有研究發(fā)信現(xiàn)成纖維細(xì)胞生長因子抑制劑

4、可抑制腎癌進(jìn)展，延長無進(jìn)展生存時(shí)間。由于多數(shù)FGFs發(fā)揮生物活性需結(jié)合肝素和硫酸肝素，目前FGFs抑制劑如蘇拉明、反應(yīng)停已進(jìn)入臨床試驗(yàn)，其通過電荷吸引作用結(jié)合FGFs阻斷與肝素結(jié)合抑制FGFS生物效應(yīng);但由于其特異性差，副作用較大，針對(duì)FGFR的抑制劑已發(fā)展至第二代，其中第二代FGFR具有特異性高，副反應(yīng)較少的特點(diǎn)。BGJ398是一種高選擇性的FGFR抑制劑，作用于FGFR1、FGFR2和FGFR3，其對(duì)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、黑色素瘤、肺癌等的

5、治療作用已經(jīng)進(jìn)入了Ⅱ期臨床試驗(yàn)階段。其對(duì)腎細(xì)胞癌的治療作用目前暫不明確，需進(jìn)一步研究明確。
　　主要內(nèi)容與結(jié)論:
　　實(shí)驗(yàn)方法:用不同濃度0、0.1、0.5、1、2、5、10μmol/L的FGFR抑制劑BGJ398處理體外培養(yǎng)的人源腎癌細(xì)胞OS-RC-2后，通過MTT法檢測細(xì)胞增殖變化;激光共聚焦顯微鏡觀察對(duì)細(xì)胞的活力和骨架的影響;Transwell小室法檢測BGJ398對(duì)人腎癌細(xì)胞侵襲能力的影響。
　　結(jié)論:MTT結(jié)

6、果顯示BGJ398處理OS-RC-2細(xì)胞48h后，細(xì)胞的相對(duì)增殖率RGR隨作用濃度的增高而逐漸降低。BGJ398的濃度為10μmol/L時(shí)，細(xì)胞的相對(duì)增殖率僅僅為3.5％。結(jié)果說明BGJ398對(duì)腎癌細(xì)胞的增殖具有明顯的抑制作用。采用熒光染色實(shí)驗(yàn)提示當(dāng)BGJ398濃度大于5μmol/L時(shí)，視野下僅有死細(xì)胞存在。該結(jié)果說明BGJ398可顯著抑制人腎癌細(xì)胞的活力。BGJ398可顯著抑制人腎癌細(xì)胞鋪展和黏著斑形成。Transwell小室顯示當(dāng)B