成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體抑制劑NVP-BGJ398對(duì)膠質(zhì)瘤生長(zhǎng)的影響.pdf

1、目的:
　　檢測(cè)FGFR抑制劑NVP-BGJ398對(duì)抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的影響;檢驗(yàn)NVP-BGJ398對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞形成血管生成擬態(tài)的影響;探索NVP-BGJ398影響膠質(zhì)瘤細(xì)胞的機(jī)制。
　　方法:
　　1、進(jìn)行WB實(shí)驗(yàn)和免疫組化染色分析蛋白表達(dá);
　　2、運(yùn)用增殖實(shí)驗(yàn)、平板克隆實(shí)驗(yàn)和皮下移植瘤模型檢測(cè)膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長(zhǎng);
　　3、進(jìn)行侵襲實(shí)驗(yàn)和遷移實(shí)驗(yàn)分析腫瘤細(xì)胞的侵襲和遷移能力;
　　4、運(yùn)

2、用小管生成實(shí)驗(yàn)和CD34/PAS雙染檢測(cè)腫瘤細(xì)胞血管擬態(tài)的形成;
　　5、統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果:
　　1、Western blotting顯示NVP-BGJ398處理可以有效的抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的FGFR磷酸化激活成為pFGFR和降低膠質(zhì)瘤細(xì)胞中Vimentin、MMP2和MMP14的表達(dá)(P＜0.05）;
　　2、CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明經(jīng)過(guò)NVP-BGJ398的處理兩株細(xì)胞的增殖速度明顯的下降(P＜0.05);平

3、板克隆實(shí)驗(yàn)對(duì)照組中克隆形成數(shù)量遠(yuǎn)大于經(jīng)過(guò)NVP-BGJ398實(shí)驗(yàn)組(P＜0.05);
　　3、劃痕實(shí)驗(yàn)中對(duì)照組U251MG細(xì)胞遷移速度明顯快于NVP-BGJ398實(shí)驗(yàn)組(P＜0.05);Transwell遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明穿膜細(xì)胞數(shù)在NVP-BGJ398處理后都明顯的減少（P＜0.05）;
　　4、小管形成實(shí)驗(yàn)中NVP-BGJ398實(shí)驗(yàn)組中膠質(zhì)瘤細(xì)胞小管周長(zhǎng)和交點(diǎn)數(shù)較對(duì)照組明顯的減少;
　　5、U87MG皮下成瘤實(shí)

4、驗(yàn)中NVP-BGJ398實(shí)驗(yàn)組(0.19±0.06g)腫瘤重量明顯輕于對(duì)照組(0.45±0.11g)(P＜0.05);
　　6、CD34/PAS雙染VM計(jì)數(shù)結(jié)果顯示皮下瘤模型NVP-BGJ398實(shí)驗(yàn)組中VM的數(shù)量(13.85±3.96)較對(duì)照組(26.40±5.06)明顯的減少（P＜0.05）;
　　7、免疫組織染色顯示NVP-BGJ398實(shí)驗(yàn)組中Vimentin、MMP2和MMP14平均光密度(2.50±0.36，1.89

5、±0.95，1.26±0.15)明顯淺于對(duì)照組(4.13±1.15，4.90±0.52,3.77±0.39)(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　在體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)FGFR抑制劑NVP-BGJ398具有良好的抗膠質(zhì)瘤作用。NVP-BGJ398除了抑制腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移以及侵襲，還具有抑制血管生成擬態(tài)生成的作用。其機(jī)制與能夠抑制FGFR的激活下調(diào)vimentin、MMP14和MMP2的表達(dá)有關(guān)。提示成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體是治療