腦苷肌肽在大鼠腦出血后的神經保護效應及機制研究.pdf

1、腦出血破入腦室的高發(fā)病率、高死亡率和高致殘率給全球帶來沉重的經濟負擔。然而迄今為止，針對腦出血外科手術治療及血壓管理的幾項臨床實驗均為陰性結果，1000余種神經保護藥物的臨床轉化也均宣告失敗，腦出血臨床治療尚且缺乏有效的治療方法。目前基礎研究也多集中研究單純腦出血，針對腦出血破入腦室這一嚴重腦出血亞型的研究尚為一片空白，此外面對腦出血破入腦室后復雜的病理損傷機制，目前單一靶點、單一分子通路的神經保護藥物研究恐難有成效。 腦苷肌肽

2、，一種復合型多靶點神經保護藥物，具有高度血腦屏障通透性，其主要成分為多肽、多種神經節(jié)苷脂、游離氨基酸、次黃嘌呤等，臨床應用于治療中樞神經及周圍神經損傷疾病，基礎研究也已證實其在阿茲海默病、創(chuàng)傷性腦損傷、視網膜變性等多種動物模型中具有神經保護作用，但其在出血性卒中的神經保護效應及機制目前仍不清楚。 本實驗第一部分建立大鼠腦出血破入腦室模型，研究不同劑量腦苷肌肽對大鼠腦出血破入腦室后神經功能恢復的影響;第二部分，研究腦苷肌肽在腦出血

3、破入腦室后神經保護效應的可能作用機制和潛在靶點，為腦出血破入腦室的臨床治療提供新的思路及方法。 一、Ⅳ型膠原酶誘導大鼠腦出血并破入腦室模型的建立及腦苷肌肽最適劑量探索 目的： 通過對傳統(tǒng)大鼠腦出血模型進行改良，建立大鼠腦出血破入腦室標準化模型，運用行為學評估手段，評估多靶點復合神經保護藥物腦苷肌肽不同劑量對大鼠腦出血后神經功能恢復的影響。 方法： 參照Rosenberg等提出的方法，并在本實驗室前

4、期研究工作基礎上，調整Ⅳ型膠原酶注射坐標及劑量，將0.2UⅣ型膠原酶注入大鼠右側腦基底節(jié)區(qū)（前囟旁3毫米、后2毫米、深6毫米），3天后灌注取腦觀察血腫破入腦室情況。將大鼠隨機分為假手術組（Sham組），模型組（ICH組），模型+腦苷肌肽高劑量治療干預組(ICH+4ml/kgCEGI)，模型+腦苷肌肽低劑量治療干預組(ICH+1ml/kg CEGI)，模型+神經節(jié)苷脂治療干預組(ICH+GM1)，術后3天、7天、14天運用改良加西亞量表，

5、轉角試驗兩種方法評估大鼠神經功能恢復情況。 結果： 1、術后3天可見血腫形成且破入側腦室，腦室擴張; 2、神經節(jié)苷脂與4ml/kg腦苷肌肽能夠顯著改善大鼠腦出血預后，促進大鼠神經功能恢復; 3、低劑量腦苷肌肽干預組大鼠神經功能缺損與模型組無明顯差異。 結論： 此模型建立方法效果確切，成功模擬了臨床腦出血并破入腦室這一嚴重腦出血亞型，此外，行為學結果提示，4ml/kg腦苷肌肽能夠改善大鼠腦出

6、血預后，其機制需要進一步探究。 二、腦苷肌肽治療大鼠腦出血并破入腦室的機制研究 目的： 在第一部分研究中，我們發(fā)現大鼠腦出血破入腦室在經過4ml/kg腦苷肌肽連續(xù)干預14天后，其神經功能缺損得到顯著改善，新近文獻表明腦苷肌肽的幾項主要組成成分具有抗氧化、促進軸突再生、再髓鞘化等作用，因此，本實驗擬探究腦苷肌肽治療大鼠腦出血破入腦室的可能機制。 方法： 將實驗動物隨機分成假手術組（Sham組），模型

7、組（ICH組），模型+腦苷肌肽治療干預組(ICH+4ml/kg CEGI)。術后2小時首次腹腔注射給藥，連續(xù)給藥14天。分別在術后3天、7天、14天運用小動物7.0T核磁共振成像動態(tài)觀察血腫、側腦室體積變化。術后7天、14天運用激光共聚焦、透射電子顯微鏡等技術手段動態(tài)觀察腦出血后血腫周圍及皮層白質損傷。 結果： 1、腦苷肌肽治療干預組術后第14天血腫吸收率較模型組顯著提高; 2、腦苷肌肽治療干預組術后第14天側腦

8、室體積擴張程度顯著減緩，遠期重度腦積水發(fā)生率顯著下降;
　　3、腦苷肌肽治療干預組術后7天、14天皮層髓鞘堿性蛋白表達量顯著增加，血腫周圍白質纖維束超微結構損傷明顯改善。 結論： 大鼠腦出血破入腦室，經過腦苷肌肽干預后，出血后血腫周圍及皮層白質損傷能夠顯著緩解，血腫吸收得到促進，側腦室體積擴張程度減緩，遠期重度腦積水發(fā)生率降低，神經功能恢復得到促進，腦苷肌肽具有顯著的神經保護作用，因此可作為腦出血破入腦室臨床治療的