羥丁基幾丁糖膜修補硬腦膜缺損的實驗研究.pdf

1、第一部分:羥丁基幾丁糖膜的制備、結(jié)構(gòu)及性能的研究
　　目的:羥丁基幾丁糖膜的制備、表征、性能研究:制備羥丁基幾丁糖膜，研究其微觀結(jié)構(gòu)、力學性能、生物安全性、生物相容性、降解性能、防粘連性能及對成纖維細胞的作用。評估羥丁基幾丁糖膜作為硬腦膜替代材料的優(yōu)缺點。
　　方法:利用明膠與溫敏性幾丁糖反向溫敏特性，采用明膠相變涂層的方式制備羥丁基幾丁糖膜，電鏡下觀察其超微結(jié)構(gòu)，對其拉伸強度及拉伸韌性進行檢測，與正常硬腦膜進行比較，并探討

2、羥丁基幾丁糖膜作為硬腦膜替代材料的生物相容性、可降解性、以及對成纖維細胞生長的影響，評估其是否具有防粘連作用。
　　結(jié)果:羥丁基幾丁糖膜干態(tài)下呈現(xiàn)極高的拉伸強度，濕態(tài)下呈現(xiàn)出較好的拉伸韌性，其拉伸韌性強于人硬腦膜。電鏡下觀察羥丁基幾丁糖膜橫切面及縱切面均為網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，呈蜂窩狀的立體結(jié)構(gòu)。羥丁基幾丁糖膜具有良好生物相容性和防粘連作用，成纖維細胞培養(yǎng)結(jié)果顯示出對成纖維細胞增殖的促進作用。
　　結(jié)論:羥丁基幾丁糖膜力學性能、生物相容

3、性良好，對成纖維細胞生長有促進作用，具有良好預(yù)防粘連的作用
　　第二部分:羥丁基幾丁糖膜即時封堵腦脊液漏實驗研究
　　目的:羥丁基幾丁糖膜即刻封堵腦脊液漏的研究:構(gòu)建兔硬腦膜缺損致腦脊液漏的動物模型，使用羥丁基幾丁糖膜修復(fù)，評價羥丁基幾丁糖膜即刻封堵腦脊液漏的效果。
　　方法:取健康成年新西蘭家兔5只，在兔顱中線兩側(cè)對稱造成兩個1.2*1.2CM顱骨缺損，暴露硬腦膜，并造成0.8*0.8CM硬腦膜及蛛網(wǎng)膜缺損，使腦脊液

4、外漏，實驗組使用羥基丁幾丁糖膜修復(fù)硬腦膜缺損;對照組僅造成相同大小硬腦膜及蛛網(wǎng)膜缺損不做處理。再于距兩側(cè)硬腦膜缺損約3CM顱骨中線處鉆一小孔，采用頭皮針導管沿小孔置入蛛網(wǎng)膜下腔，用20ML注射器抽取10ML美蘭溶液緩慢沿導管推入蛛網(wǎng)膜下腔，觀察雙側(cè)腦脊液外滲情況。
　　結(jié)果:羥丁基幾丁糖膜貼服性良好，可嚴密覆蓋硬腦膜缺損，實驗中向蛛網(wǎng)膜下腔注入美蘭溶液，實驗側(cè)未見腦脊液從羥丁基幾丁糖膜邊緣滲出，對照側(cè)美蘭溶液滲出明顯，5只實驗動物

5、結(jié)果一致。
　　結(jié)論:羥丁基幾丁糖膜可有效封堵硬腦膜缺損引起的腦脊液漏。
　　第三部分:羥丁基幾丁糖修復(fù)硬腦膜缺損遠期效果的實驗研究
　　目的:羥丁基幾丁糖膜修復(fù)硬腦膜缺損的遠期效果:構(gòu)建兔硬腦膜缺損動物模型，將羥丁基幾丁糖膜(HBCM)與臨床上使用的生物膜（牛肌腱Ⅰ型膠原）進行對照研究，評價羥丁基幾丁糖膜修復(fù)硬腦膜缺損的遠期效果。
　　方法:健康成年新西蘭兔15只，顱中線兩側(cè)對稱造成0.8×0.8CM硬腦膜缺損

6、，左側(cè)使用羥基丁幾丁糖膜覆蓋硬腦膜缺損作為實驗組，右側(cè)使用生物膜（牛肌腱Ⅰ型膠原）覆蓋缺損作為對照組，觀察術(shù)后實驗動物一般情況，術(shù)后30天、90天、180天分別處死5只實驗動物，觀察手術(shù)區(qū)域有無粘連、炎癥反應(yīng)等大體情況，切取手術(shù)區(qū)域組織行HE染色觀察，行成纖維細胞計數(shù)，與正常硬腦膜進行比較，取術(shù)后90天實驗組新生膜行電鏡觀察。
　　結(jié)果:(1)一般情況:術(shù)后所有實驗動物狀態(tài)良好，無癱瘓、大小便失禁等神經(jīng)癥狀，未見傷口感染。(2)大

7、體觀察:術(shù)后30天見生物膜（牛肌腱Ⅰ型膠原）大部分被吸收，90天已被完全吸收，術(shù)后30天、90天、180天3個時間點均未見生物膜及其周圍慢性炎癥，3個時間點羥基丁幾丁糖膜下均可見半透明新生膜覆蓋腦組織，新生膜與腦組織及羥丁基幾丁糖膜無粘連，腦組織顏色未見明顯異常;術(shù)后180天未見羥丁基幾丁糖膜被吸收跡象，羥丁基幾丁糖膜容易取出，與周圍組織無粘連。(3) HE染色:術(shù)后30天羥丁基幾丁糖膜下新生膜中可見大量成纖維細胞及膠原纖維，術(shù)后30天

8、生物膜側(cè)組織中可見成纖維細胞、膠原纖維及大量脂肪細胞，成纖維細胞密度較羥丁基幾丁糖膜側(cè)低;兩組成纖維細胞計數(shù)有統(tǒng)計學差異。術(shù)后180天，羥丁基幾丁糖膜下新生膜中成纖維細胞明顯減少，大量膠原纖維排列整齊，與兔硬腦膜高度相似，成纖維細胞計數(shù)較正常兔硬腦膜無統(tǒng)計學差異;術(shù)后180天生物膜（牛肌腱Ⅰ型膠原）側(cè)組織中可見大量脂肪細胞，成纖維細胞及膠原纖維少，與正常兔硬腦膜相似性低，成纖維細胞計數(shù)與正常硬腦膜有統(tǒng)計學差異;術(shù)后30天、90天、180