酶解豆粕蛋白制備ACE抑制肽的研究.pdf

1、本課題分別采取直接酶解和納豆芽孢桿菌發(fā)酵兩種方式對豆粕蛋白進行酶解，制備具有ACE抑制活性的短肽產(chǎn)品，旨在提高豆粕蛋白的利用價值。實驗優(yōu)化了兩種不同方法制備活性肽的最佳工藝條件，并對其進行比較，由此得到最優(yōu)方法，并進行100L放大實驗，初步建立了利用豆粕蛋白制備ACE抑制肽的工藝流程，得到的主要結(jié)論如下：
　　 (1)豆粕預(yù)處理：經(jīng)過酸堿浸泡、超聲波以及加熱處理三種方式的實驗，結(jié)果表明三種方式均對ACE抑制率的提高和納豆菌的生長

2、有一定的促進作用，綜合考慮多重因素，對酶解底物豆粕進行加熱前處理，對發(fā)酵底物豆粕進行超聲波前處理。
　　 (2)單酶水解：堿性蛋白酶水解豆粕產(chǎn)生ACE抑制肽效果最佳，條件為底物濃度5％，酶濃度5000U/g，水解時間2h，胰蛋白酶水解豆粕產(chǎn)生ACE抑制肽的最佳條件為底物濃度5％，酶濃度800U/g，水解時間為2h。且堿性蛋白酶制備ACE抑制肽活性最高，達到48.67％。
　　 (3)復(fù)合酶解：通過響應(yīng)面分析法對堿性蛋白酶

3、和胰蛋白酶組合分步水解條件進行優(yōu)化，確定最佳條件為堿性蛋白酶濃度5100U/g，pH9，水解時間2h；胰蛋白酶濃度850U/g，pH8，水解時間為2h。在該條件下進行試驗驗證，堿性蛋白酶與胰蛋白酶先后水解豆粕產(chǎn)物的ACE抑制率達到73.31％。
　　 (4)豆粕液的納豆芽孢桿菌發(fā)酵：以菌懸液OD值為指標(biāo)，碳氮源比例為1:5，功率80W的超聲波預(yù)處理豆粕培養(yǎng)基4.32分鐘，發(fā)酵培養(yǎng)條件為pH6.16，溫度35.5℃時，菌懸液濃度達