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文檔簡介
1、井岡霉素是由吸水鏈霉菌井岡變種(Streptomyceshygroscopicusvar.jinggangsisyen)發(fā)酵產(chǎn)生的氨基糖苷類農(nóng)用抗生素,對水稻紋枯病有顯著的防治效果。雖然從井岡霉素發(fā)現(xiàn)迄今已有數(shù)十年,但由于其高效、低毒,對環(huán)境安全,并且尚未發(fā)現(xiàn)抗藥性,該產(chǎn)品仍擁有穩(wěn)定的市場。本文利用低能氮離子注入技術(shù)對吸水鏈霉菌井岡變種進(jìn)行了誘變處理,得到一株遺傳穩(wěn)定的高產(chǎn)菌株,并對所得高產(chǎn)菌株進(jìn)行了發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化。
首
2、先對原始菌株SHJ001進(jìn)行氮離子注入誘變條件的探索,結(jié)果顯示,在氮離子束注入能量為10keV條件下,劑量為80×2.6×1013ion/cm2時(shí),正突變率最高,達(dá)到71.4%,且正變幅較大,最高可達(dá)30.3%。選擇該劑量為最佳誘變劑量,進(jìn)行高產(chǎn)菌株的篩選工作。通過對多次誘變結(jié)果統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn),氮離子注入誘變對吸水鏈霉菌井岡變種致死率和正突變率都比較高。通過多次誘變和檢測,最終篩選到一株遺傳穩(wěn)定的高產(chǎn)菌株SHJ381,其井岡霉素A含量比原始菌
3、株提高了約13%,達(dá)到25.4g/L。
經(jīng)過誘變,高產(chǎn)菌株的特性發(fā)生變化,故對其發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行了優(yōu)化。在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,通過Plackett-Burman實(shí)驗(yàn)和L9(34)正交實(shí)驗(yàn),得到高產(chǎn)菌株的最適培養(yǎng)基為:大米粉8%,淀粉0.7%,黃豆粉1%,酵母粉1%,KH2PO40.12%,NaCl0.15%,CaCO30.2%,玉米粉1.4%。相同條件下,最優(yōu)培養(yǎng)基發(fā)酵產(chǎn)生井岡霉素A含量比原始培養(yǎng)基提高了約38%,達(dá)到約34
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