楊樹(shù)PsneIF5A2-4基因的抗逆功能分析.pdf_第1頁(yè)
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1、U n i v e r s i t y C o d e :1 0 2 2 5R e g i s t e r C o d e :$ 1 5 7 1 2D i s s e r t a t i o nf o rt h e D e g r e eo f M a s t e rA n a l y s i s o f t h ef u n c t i o n a l C h a r a c t e r i z a t i o no f P s n

2、e l F 5 A 2 /4g e n eC a n d i d a t e :S u p e r v i s o r :A s s o c i a t eS u p e r v i s o r :A c a d e m i c D e g r e e A p p l i e d f o r :S p e c i a l i t y :D a t e o f O r a l E x a m i n a t i o n :U n i v

3、e r s i t y :Z h a oS i w e nP r o f .Q uG u a n —Z h e n gL e c t u r e r Z h a oX i .Y a n gM a s t e rF o r e s tT r e e G e n e t i c sa n d B r e e d i n gJ u l y ,2 0 1 5N o r t h e a s t F o r e s t r yU n i v e r

4、 s i t yA b s t r a c tE f f e c to fp l a n te I F 5 A p r o t e i n si nav a r i e t yo fb i o l o g i c a lp r o c e s si s a se V e r y o n ek n o w s ,s u c ha sp r o t e i n s y n t h e s i sr e g u l a t i o n ,t

5、r a n s l a t i o ne l o n g a t i o no fm R N A t 啪o V e r ,p r o g r 鋤m e dc e l ld e a t h ,a n d s t r e s st o l e r a n c e e t c ·..T h i sS t u d vu s e d P C R t e c h n o l o g yf r o mP o p l a r ( P o p

6、u l u ss i m o n i i ×Pn i g r a ) w a s c l o n e dI n t ot h e t w o e u k a r y o t i c t r a n s l a t i o n i n i t i a t i o nf a c t o re D N A ( E u k a r y o t i c t r a n s l a t i o ni n i t i a t i o nm

7、l e a v e 8o f f a c t o r5 A ) g e n e ( e l F 5 A 2 /4 ) .T h r o u g hs e q u e n c e a n a l y s i s ,w ef o u n d t h a tp o p l a re l F 5 A 2 /4 鋤de l F 5 A 1g e n e sa r et h eo n h o l o g u e si nA r a b i d o

8、p s i s .T h ed e d u c e da m i n oa c i ds e q u e n c eo f t n e s et w o g e n es e q u e n c es h o w e d9 8 %s i m i l a r i t y t o e a c ho t h e r .T h es u b c e l l u l a rl o c a l l 殂t i o n 螄a l y s l 8r e

9、s u l t ss h e w e d t h a tt h eP s n e l F 5 A 2 /4p r o t e i ni sl o c a l i z e d t o t h e n u c l e u s a n d t h ec y t o p l a s m ·l n eq R T - P C R a n a l y s i so f t h ee x p r e s s i o n p a t t e m

10、o f P s n e l F 5 A 2 /4i nd i f f e r e n tt i s s u e s 甜p o p l 盯8 h o wt h a tt h e s et w o g e n e sa r et r a n s c r i b e di na l lp o p l a rt i s s u es a m p l e s .T h ee l F 5 A 2 /4w a s l i g a t e dmt h

11、e v e a s t e x p r e s s i o n v e c t o r p Y E S 2 一e l F 5 A 2 /4 a n d t r a n s f o r m e d i n t o y e a 8 t ( s a c c 向口陽(yáng)啦妒P Jc P 陀v 括f 口曲o f u r a c i la u x o t r o p h i cs t r a i n s I N V S c l .P C R a n d

12、 N o r t h e r n b l o tr e s u l t s c o n f i r m e dt h a tt h ee x D r e s s i o no f e l F 5 A 2 /4c o u l d b ei n d u c e d b yg a l a c t o s ei no b t a i n e d t r a n s g e n l cs t r a t u s .1 h eg r o w t h

13、c o m p 越s o n o f t r a n s g e n i cs t r a i n sa n d n o - l o a ds t r a i n su n d e r N a C l s t r e s s e s s h o w e d t h a tu n d e r m ea b i o t i cs t r e s st r a n s g e n i cs t r a i ns h o w e d h i g

14、 h e rs u r v i v a l c o l o n yn u m b e rt h a nt h a to tn o nt m s g e n i c s t r a i n s ,s u g g e s t i n g t h a t t h e e I F 5 A 2 /4 g e n e i m p r o v e d s t r e s s r e s l s 協(xié)n c e o 士t r a i l s g e n

15、i cy e a s t .I na d d i t i o n ,t r a n s g e n i c A r a b i d o p s i st h a l i a n a ,o b t m n e db yA g r o b a c t e r i 啪一m e d i a t e dm e t l l o d ,o v e r e x p r e s s i n gP s n e l F 5 A 2s h o w e de n

16、 h a n c e dS O D ,P O Da c t i v i t y ,。e d u c e dt h ec o p p e rs u l f a t e a n d M D A a n d e l e c t r o l y t e l e a k a g eu n d e r s a l ts t r e s s ·K e y w o r d s : P o p l a r ( P o p u l u s s p

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