單面針?biāo)幱贸煞諬PLC指紋圖譜及其質(zhì)量評價研究.pdf

1、中藥材單面針（學(xué)名蜆殼花椒Zanthoxylum dissitum Hemsl）為蕓香科花椒屬植物，能祛風(fēng)活絡(luò)、散瘀止痛、解毒消腫，是許多中成藥組方中的主要成分，具有良好的發(fā)展前景。目前，單面針完全處于野生狀態(tài)，隨著需求量的增大，單面針野生資源逐年減少，正面臨著資源匱乏與生態(tài)破壞的雙重危機(jī)。為更好的開發(fā)利用這一中藥，控制其質(zhì)量，本課題對單面針的質(zhì)量進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，主要研究結(jié)果如下:
　　 (1)建立了一種測定單面針?biāo)幉闹邪柞r堿

2、含量的高效液相色譜(HPLC)分析方法。以產(chǎn)于湖北恩施、湖南張家界和貴州銅仁3個主產(chǎn)區(qū)的單面針和經(jīng)人工快繁栽培于長沙的單面針為材料，采用超聲波輔助提取，色譜柱為SinoChromODS-BPC18柱(4.6mm×250mm，5μm)，以乙腈-0.01mol/L磷酸二氫鈉緩沖液(50∶50)為流動相，流速0.8mL/min，在波長236nm處進(jìn)行白鮮堿含量檢測。方法簡便易行，數(shù)據(jù)可靠，為單面針?biāo)幉牡馁|(zhì)量檢測標(biāo)準(zhǔn)提供了一種科學(xué)的、可行的檢測

3、方法。
　　 (2)單面針?biāo)幉腍PLC指紋圖譜方法的建立。以單面針為研究對象，詳細(xì)考察了其藥用部位的色譜分離條件，包括供試品溶液制備、色譜條件等影響因素，初步確定了單面針?biāo)幉牡腍PLC指紋圖譜的建立方法，以80％甲醇溶液為提取溶劑，超聲波震蕩30min，制備單面針?biāo)幉臉悠啡芤?選用AgilentEclipseXDBC18柱色譜柱，以水+0.1％TFA(A)-乙腈(B)為流動相，按非線性梯度洗脫條件:0～35min,8％～35％A

4、;35～50min,35％～70％A;50～65min,70％～80％;65～70min,80％～8％，進(jìn)行梯度洗脫，選檢測波長254nm，流速為0.8mL/min，并通過精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性實驗進(jìn)行驗證。
　　 (3)不同產(chǎn)地單面針HPLC指紋圖譜的建立。按照確定的指紋圖譜建立方法，對13批單面針?biāo)幉倪M(jìn)行測定，初步建立了單面針?biāo)幉闹讣y圖譜，確定其中的16個共有峰作為指紋圖譜的特征組成，并生成了單面針指紋圖譜的共有模式。采用相

5、似度作為指紋圖譜的評判參數(shù)，計算了不同批次間的相似度，相似度在0.30-0.974之間，表明不同產(chǎn)地的單面針樣品中化學(xué)成分的組成基本一致，但組分的量上存在一定的差異。對不同產(chǎn)地單面針樣品的指紋圖譜進(jìn)行聚類分析和主成分分析，二者分析結(jié)果基本一致，表明指紋圖譜技術(shù)結(jié)合聚類分析和主成分分析是評價不同產(chǎn)地單面針的有效方法之一，可為單面針的質(zhì)量控制提供更全面的參考。
　　 (4)不同來源單面針HPLC色譜圖的比較。首先對不同產(chǎn)地的單面針進(jìn)

6、行分析，結(jié)果表明，長沙、恩施、銅仁、廣西、張家界五個產(chǎn)地的單面針樣品HPLC圖譜主要峰群的整體面貌基本一致，但各色譜峰的峰高或響應(yīng)值有較大差別;從化學(xué)成分的總體含量上分析，恩施和銅仁的整體品質(zhì)較差，長沙次之，南寧和張家界產(chǎn)單面針品質(zhì)最好。其次以單面針的根部、莖部及葉（嫩葉、老葉）為研究對象，初步探討了HPLC色譜圖的不同。葉中更多的含有水溶性或極性較大的成分而根部、莖部更多的含有脂溶性或是極性較小的成分;莖部與根部指紋圖譜相似，化學(xué)成分