尿液exosomes的分離、富集、純化及其內部蛋白指紋圖譜分析

1、南方醫(yī)科大學2 0 1 1 級博士學位論文尿液e x o s o m e s 的分離、富集、純化及其內部蛋白指紋圖譜分析U r i n a r yE x o s o m e s E n r i c h m e n t ，P u r i f i c a t i o n ，a n d t h eI n t e r n a lP r o t e o m e P r o f i l e A n a l y s i s課題來源： 導師指定課題學位

2、申請人導師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學院劉新宇鄒和群內科學( 腎病)在職博士博士研究生研究生學院2 0 15 年0 3 月2 0 日萬方數據中文摘要目前也有不少關于對血液、尿液、唾液等e x o s o m e s 的研究發(fā)現了多種疾病的生物標記物，有望對指導疾病的早期與個體化治療帶來新的希望。2 0 0 4 年，P i s i t k u n 等首先報道在尿液中發(fā)現并分離出e x o s o m e s 。人體尿液中含有大量的e

3、 x o s o m e s ，其可以由泌尿系統(tǒng)( 包括腎臟、膀胱、前列腺) 的所有上皮細胞釋放進入尿液。尿液e x o s o e m s 與其它類型的e x o s o m e s 一樣，攜帶大量來源細胞的信息，十分有利于探索特定細胞的生理功能與病理變化。通過蛋白組學等方法人們已經在分離出的正常人尿液e x o s o m e s 中鑒定出超過1 0 0 0種蛋白質。尿液相對于其它體液具有無創(chuàng)、人量的獨特優(yōu)點，對泌尿系統(tǒng)疾病的早期診

4、斷生物標記物、治療和監(jiān)測的靶點以及疾病的發(fā)病機制等研究具有極大的意義。近年來的一些研究發(fā)現，尿液e x o s o m e s 蛋白譜的變化可以反映某些特定的腎臟病變情況。E x o s o m e s 可以攜帶信息穿梭于腎臟細胞之間，改變受體細胞蛋白譜與功能，這可能代表著一種’腎單位內細胞與細胞間的信號傳遞機制。近年來結合尿e x o s o m e s 分離技術及先進的蛋白質組學技術已經檢測出不少腎臟結構與功能損害相關的尿e x o

5、 s o m e s 生物標記物。尿液e x o s o m e s 的發(fā)現對糖尿病腎病發(fā)病機制、早期診斷和監(jiān)測標記物的研究帶來了新的方向。最近( 2 0 1 4 年) Z u b i r iI 等發(fā)表在《JP r o t r o m i c s ) ) 上的論文報道其在對糖尿病腎病患者尿液e x o s o m e s 質譜分析結果，其首先比較了兩種目前常用的尿液e x o s o m e s分離富集方法，然后選擇較適宜的方法進行液相

6、色譜．串聯(lián)質譜( L C ．M S ／M S )分析。結果顯示A M B P 、M L L 3 、V D A C l 這三種蛋白在糖尿病l 腎病與正常組尿液e x s o m e s 中表達差異，可以作為糖尿病腎病早期診斷的備選生物標記物。除上述研究外，還有尿e x o s o m e s 用于急性腎損傷、多囊腎、腎臟纖維化、膀胱癌等疾病的報道。尿液e x o s o m e s 給腎臟病等泌尿系統(tǒng)疾病的研究帶來了極大的前景，但目前還處