乳酸脫氫酶

1、乳酸脫氫酶（乳酸脫氫酶（LactatedehydrogenaseLDH）是存在于細胞漿內(nèi)的一種酶，乳酸脫氫酶在生命體中糖代謝中扮演重要角色。在我們培養(yǎng)的細胞中乳酸脫氫酶分別存在于以下三個地方：1、存在于活細胞內(nèi)。若你培養(yǎng)的是貼壁細胞(viableadherentcells)，那么貼在壁上的就是活細胞，此時的乳酸脫氫酶就存在于細胞內(nèi)，所以測得貼壁細胞中的乳酸脫氫酶（LDH）活力就代表培養(yǎng)細胞中活細胞的量，我們稱之為LDHV。2、存在于漂浮

2、于培養(yǎng)液中的凋亡小體(Apoptoticbodies)。由于凋亡小體有細胞膜，因此凋亡小體中的乳酸脫氫酶也沒有釋放到胞外。此時測得凋亡小體中的乳酸脫氫酶（LDH）活力就代表培養(yǎng)細胞中凋亡細胞(apoptoticcell)的量，我們稱之為LDHa。3、存在于培養(yǎng)液中。壞死的細胞(Necrosis)胞膜破裂乳酸脫氫酶釋放，分布于培養(yǎng)液中此時測得培養(yǎng)液乳酸脫氫酶（LDH）活力就代表培養(yǎng)細胞中壞死細胞(necroticcell)的量，我們稱之為

3、LDHn。那么我們就可以計算細胞中凋亡或壞死的比率來衡量細胞損傷的程度。凋亡%=LDHa(LDHaLDHnLDHv)100壞死%=LDHn(LDHaLDHnLDHv)100死亡%=(LDHaLDHn)(LDHaLDHnLDHv)100其中(LDHaLDHnLDHv)代表細胞總LHD。因為即使我們每次埋板的細胞數(shù)相同，但是由于細胞生長受多方面影響，所得的細胞數(shù)量也不一樣，所以每次測得胞內(nèi)和胞外乳酸脫氫酶的量都會不一樣，所以不能單純通過測上

4、清中LDH的量或測細胞總LHD來評估細胞受損的程度，而通過上清LDH總LDH的比率來評估細胞受損程度是比較符合實際。另附簡要操作：吸取細胞培養(yǎng)瓶中液體置離心管中離心，離心后沉淀于管底的是凋亡小體，上清液中的就是壞死細胞的LDH將凋亡小體和貼附于培養(yǎng)瓶壁上的細胞破膜即可測定凋亡小體和活細胞的LDH.乳酸脫氫酶（乳酸脫氫酶（LactatedehydrogenaseLDH）是存在于細胞漿內(nèi)的一種酶，乳酸脫氫酶在生命體中糖代謝中扮演重要角色。在

5、我們培養(yǎng)的細胞中乳酸脫氫酶分別存在于以下三個地方：1、存在于活細胞內(nèi)。若你培養(yǎng)的是貼壁細胞(viableadherentcells)，那么貼在壁上的就是活細胞，此時的乳酸脫氫酶就存在于細胞內(nèi)，所以測得貼壁細胞中的乳酸脫氫酶（LDH）活力就代表培養(yǎng)細胞中活細胞的量，我們稱之為LDHV。2、存在于漂浮于培養(yǎng)液中的凋亡小體(Apoptoticbodies)。由于凋亡小體有細胞膜，因此凋亡小體中的乳酸脫氫酶也沒有釋放到胞外。此時測得凋亡小體中的

6、乳酸脫氫酶（LDH）活力就代表培養(yǎng)細胞中凋亡細胞(apoptoticcell)的量，我們稱之為LDHa。3、存在于培養(yǎng)液中。壞死的細胞(Necrosis)胞膜破裂乳酸脫氫酶釋放，分布于培養(yǎng)液中此時測得培養(yǎng)液乳酸脫氫酶（LDH）活力就代表培養(yǎng)細胞中壞死細胞(necroticcell)的量，我們稱之為LDHn。那么我們就可以計算細胞中凋亡或壞死的比率來衡量細胞損傷的程度。凋亡%=LDHa(LDHaLDHnLDHv)100壞死%=LDHn(L

7、DHaLDHnLDHv)100死亡%=(LDHaLDHn)(LDHaLDHnLDHv)100其中(LDHaLDHnLDHv)代表細胞總LHD。因為即使我們每次埋板的細胞數(shù)相同，但是由于細胞生長受多方面影響，所得的細胞數(shù)量也不一樣，所以每次測得胞內(nèi)和胞外乳酸脫氫酶的量都會不一樣，所以不能單純通過測上清中LDH的量或測細胞總LHD來評估細胞受損的程度，而通過上清LDH總LDH的比率來評估細胞受損程度是比較符合實際。另附簡要操作：吸取細胞培養(yǎng)