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1、正交試驗(yàn)優(yōu)化中風(fēng)活心軟膠囊提取工藝正交試驗(yàn)優(yōu)化中風(fēng)活心軟膠囊提取工藝許良葵,聶陽(yáng),曾永玉,李宗偉(廣東食品藥品職業(yè)學(xué)院,廣州510520)[摘要]目的:優(yōu)選中風(fēng)活心方的最佳提取工藝。方法:分別用水蒸氣蒸餾法、煎煮法提取方中揮發(fā)油、水提液,以揮發(fā)油得率、葛根素含量為指標(biāo),用正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)優(yōu)化提取工藝。結(jié)果:篩選出揮發(fā)油最佳提取工藝為10倍量水,浸泡0h,蒸餾提取7h;水提液最佳提取工藝為10倍量水,煎煮1.0h,提取3次。結(jié)論:該提取工藝合
2、理可行,穩(wěn)定可靠。[關(guān)鍵詞]正交試驗(yàn);提取工藝;中風(fēng);揮發(fā)油;葛根素OptimizationoftheExtractionProcessofZhongfengHuoxinElasticCapsulebythogonalExperimentXULiangkui,NIEYang,ZENGYongyu,LIZongwei(GuangdongFoodDrugVocationalCollegeGuangzhou510520China)[Abstr
3、act]Objective:TotheoptimumextractionprocessofzhongfenghuoxinelasticcapsuleMethod:ToarrangeexperimentswiththogonaldesignL9(34)foptimizingsuitableextractiveprocesthedistillationmethodwascarriedoutfthevolatileoilfromtheprei
4、onwiththeyieldofthevolatileoilasindexethedecoctingmethodwascarriedoutfthewaterextractfromthepreionwiththecontentofpuerarinasindexesResult:Thebestextractionprocessofthevolatileoilwasasfollows:distilledf7hwith10foldtheamou
5、ntofwaterthebestextractionprocessofthewaterextractwasasfollows:extracted3timeswith10foldtheamountofwater1.0heachtime.Conclusion:Theoptimumextractionwasreasonable,stablereliable.[Keywds]thogonalexperimentextractionprocess
6、strokevolatileoilpuerarin中風(fēng)活心方出自古代臨癥方書《華佗神方》,由獨(dú)活、桂心、生葛根、炙甘草、防風(fēng)、當(dāng)歸、赤芍、附子、半夏九味藥組方,具有溫陽(yáng)、養(yǎng)血通經(jīng)絡(luò)、助經(jīng)氣的功效,對(duì)防治中風(fēng)后患肢寒冷、麻木不仁、半身不遂等后遺癥尤為適宜[1]。目前,該方以湯劑用藥,服藥量大,儲(chǔ)存及攜帶不方便,也不適合中風(fēng)臨床用藥的需要。為保留原方特色和成分,遵從原方煎煮法提取藥液,同時(shí)兼顧部分藥材揮發(fā)油的提取,結(jié)合現(xiàn)代分離、純化技術(shù),制
7、成含有揮發(fā)油、起效快、生物利用度高的軟膠囊。本實(shí)驗(yàn)分別采用正交試驗(yàn)對(duì)處方中揮發(fā)油、水提液的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化,為進(jìn)一步研究中風(fēng)活心方的有效成分及軟膠囊的研制提供依據(jù)。1材料1100型高效液相色譜儀(美國(guó)Agilent公司);葛根素對(duì)照品(批號(hào)110752200912,中國(guó)食品藥品檢定研究院);甲醇(色譜純),其他試劑均為分析純。獨(dú)活、桂心、生葛根等九味中藥均由佛山市中藥飲片廠有限公司提供。2方法與結(jié)果[基金項(xiàng)目]廣東食品藥品職業(yè)學(xué)院科研課
8、題(2011YZ010).[作者簡(jiǎn)介]許良葵,碩士,講師,從事藥物制劑的教學(xué)與研究,Tel:02028854941,直觀分析(表2)表明,影響揮發(fā)油提取效果的因素主次順序?yàn)镃AB。方差分析(表3)表明,因素A、C具有顯著性,因素B無(wú)顯著性影響。優(yōu)選的提取工藝為A3B1C3,即10倍量水,浸泡0h,蒸餾提取7h。2.3水提液提取工藝優(yōu)選2.3.1葛根素的含量測(cè)定2.3.1.1色譜條件色譜柱:C18ODS柱(4.6mm250mm5μm);流
9、動(dòng)相:甲醇水(75∶25);檢測(cè)波長(zhǎng):250nm;流速:1.0mLmin1;進(jìn)樣量:20μL;柱溫:室溫。2.3.1.2標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制精密稱取葛根素對(duì)照品5.5mg,用甲醇定容于25mL容量瓶中,即葛根素對(duì)照品溶液。精密吸取葛根素對(duì)照品溶液0.0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mL分別置于10mL容量瓶中,用流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,分別進(jìn)樣20μL,記錄吸收峰面積。以吸收峰面積Y為縱坐標(biāo),葛根素濃度X(μgmL)為橫坐標(biāo),
10、經(jīng)線性回歸,結(jié)果葛根素在2.2~22.0μgmL1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,回歸方程為Y=1672.6X+4586.3,r=0.9998。2.3.2提取工藝的優(yōu)化以加水量、煎煮時(shí)間、煎煮次數(shù)為考察因素,因素水平見表4,按L9(34)安排正交試驗(yàn),實(shí)驗(yàn)安排見表5。按處方比例稱取生葛根16g、甘草4g、附子2g三味藥材,與提取過(guò)揮發(fā)油的5種藥材藥渣混合,加水煎煮,濾過(guò),濾液濃縮至250mL,離心,取上清液加水定溶至250mL,作為提取溶液。精密移
11、取提取溶液,注入HPLC測(cè)定葛根素的含量。表4水提液提取因素水平水平A加水量倍B煎煮時(shí)間hC提取次數(shù)180.512101.023121.53表5水提液提取正交實(shí)驗(yàn)安排實(shí)驗(yàn)號(hào)ABCD葛根素含量mgg1111110.6286212220.7381313330.9463421230.8102522310.9956623120.8527731320.9735832130.7124933210.8096K10.7710.8040.7280.811
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