生物化學(xué)實驗復(fù)習(xí)題庫

1、生物化學(xué)實驗復(fù)習(xí)題庫1、卵磷脂的提取原理：卵磷脂在腦、神經(jīng)組織、肝、腎上腺和紅細胞中含量較多，蛋黃中含量特別豐富。卵磷脂易溶于醇、乙醚等脂溶劑，可利用這些脂溶劑提取。本實驗用95%乙醇提取卵磷脂，用蒸汽浴分離乙醇和卵磷脂2、卵磷脂的提取原理鑒定新提取得到的卵磷脂為白色蠟狀物，與空氣接觸后因所含不飽和脂肪酸被氧化而呈褐色。卵磷脂中膽堿基在堿性條件中分解成三甲胺，三甲胺有特異的魚腥臭味，可鑒別。3、糖的顏色反應(yīng)莫氏試驗：糖經(jīng)無機酸（濃硫酸、

2、濃鹽酸）脫水產(chǎn)生糠醛或糠醛衍生物，后者在濃無機酸作用下，能與а萘酚生成紫紅色縮合物。因為糠醛或糠醛衍生物對此均呈陽性反應(yīng)，故不是糖類的特異性反應(yīng)，但可用來鑒定糖的存在。4、糖的顏色反應(yīng)塞氏試驗：酮糖在濃酸的作用下，脫水生成5羥甲基糠醛，后者與間苯二酚作用，呈紅色反應(yīng)；有時亦同時產(chǎn)生棕紅色沉淀，此沉淀溶于乙醇，成鮮紅色溶液。此反應(yīng)是酮糖的特異性反應(yīng)，醛糖在同樣條件下成色反應(yīng)緩慢，只有在糖濃度高或煮沸時間長時，才微弱的陽性反應(yīng)。在實驗條條件

3、下蔗糖有可能水解而呈陽性反應(yīng)。塞氏試驗可鑒別酮糖的存在。5、何謂紙層析法？紙層析是最簡單的液一液相分配層析。濾紙是紙層析的支持物。當支持物被水飽和時，大部分水分子被濾紙的纖維素牢牢吸附，因此，紙及其飽和水為層析的固定相，與固定相不相混溶的有機溶劑為層析的流動相。因為不同的氨基酸在相同的溶劑中溶解度不同所以利用在濾紙上遷移速度不同分離氨基酸6何謂Rf值？影響Rf值的主要因素是什么12通過蛋白質(zhì)及氨基酸的呈色反應(yīng)實驗?zāi)阏莆樟藥追N定性鑒定蛋白

4、質(zhì)和氨基酸存在的方法它們的原理是什么雙縮脲反應(yīng)茚三酮反應(yīng)黃色反應(yīng)考馬斯亮藍反應(yīng)13、甲醛滴定法測定氨基酸的基本原理：14甲醛滴定時，加入氫氧化鈉溶液滴定的是氨基，而不是羧基，為什么？為什么選酚酞作為指示劑？15在利用醋酸纖維膜電泳分離血清蛋白時，要將點樣端靠近負極，這是什么道理。電泳分離血清蛋白時，使用的電泳緩沖液PH＝8.6，在這樣的環(huán)境中，血清蛋白的幾種蛋白質(zhì)電離后都帶上負電荷，所以只有點樣在負極端，外加電壓后，才能向正極移動，彼此

5、才能分開。16.你認為電泳失敗的原因有哪些？（1）電泳圖譜不整齊：點樣不均勻，薄膜未完全浸透或溫度過高致使膜面局部干燥或水分蒸發(fā)，緩沖液變質(zhì)；電泳時薄膜放置不正確使電流方向不平行。（2）蛋白各組分分離不佳：點樣過多，電流過低，薄膜結(jié)構(gòu)過分細密，透水性差，導(dǎo)電差等引起。（3）染色后白蛋白中間著色淺：由于染色時間不足或染色液陳舊所致；若因蛋白含量高引起，可減少血清用量或延長染色時間，一般以2分鐘為宜，若時間過長球蛋白百分比上升，AG比值會下