腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的影響因素

1、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的影響因素,郴州市第一人民醫(yī)院兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科李勝濤,2015.9.18,主要內(nèi)容,一、腫瘤標(biāo)志物的定義二、 理想的腫瘤標(biāo)志物三、影響血液和體液中腫瘤標(biāo)志物濃度的因素四、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的影響因素,惡性腫瘤、腦血管疾病、心臟病 =高死亡率！,腫瘤早期診斷早期根治的重要性,腫瘤是嚴(yán)重威脅人類健康的重大疾病，死亡率高，因此人們害怕腫瘤。而防治腫瘤的最好辦法是早期診斷、早期治療。如胃癌早期行根治術(shù)

2、，5年生存率達(dá)90%，如侵及肌層則下降為50-70%，如侵入漿膜則僅為8-17%。,所以人們對(duì)腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)寄予了極大的希望。那么腫瘤標(biāo)志物測(cè)定能否達(dá)到早期診斷的目的？能否對(duì)一般人群進(jìn)行篩查？其臨床意義到底有多大？評(píng)價(jià)有多高？引起了醫(yī)學(xué)界的爭(zhēng)議。,目前臨床應(yīng)用中常見的問題1. 對(duì)腫瘤標(biāo)志物在腫瘤診斷中的作用認(rèn)識(shí)和評(píng)價(jià)不一致，甚至錯(cuò)誤。2. 糾正“不用”和“濫用”兩個(gè)極端。,一、腫瘤標(biāo)志物的定義 腫瘤標(biāo)志物（tumor ma

3、rker，TM）是指在腫瘤的發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細(xì)胞本身所產(chǎn)生的或者是由機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的，反映腫瘤存在和生長(zhǎng)的一類物質(zhì)，包括蛋白質(zhì)、激素、酶（同工酶）、多胺等?？稍谀[瘤患者血液或體液中檢測(cè)到腫瘤標(biāo)志物。,二、 理想的腫瘤標(biāo)志物應(yīng)具有： ⑴ 靈敏度100%； ⑵ 特異性100%； ⑶ 器官特異性； ⑷ 與腫瘤的大小或分期有關(guān)； ⑸ 與預(yù)后有關(guān)； ⑹ 監(jiān)測(cè)腫瘤的復(fù)發(fā)。 然而目前所

4、應(yīng)用的腫瘤標(biāo)志物均未達(dá)到上述要求，但如正確合理使用，仍有很大臨床價(jià)值，關(guān)鍵是要正確評(píng)價(jià)腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的臨床意義。,三、影響血液和體液中腫瘤標(biāo)志物濃度的因素 1．腫瘤的大小和腫瘤細(xì)胞的數(shù)目：腫瘤越大細(xì)胞越多，腫瘤標(biāo)志物的濃度越高。,2．腫瘤細(xì)胞合成和分泌腫瘤標(biāo)志物的速度：腫瘤細(xì)胞合成和分泌腫瘤標(biāo)志物的速度越快，血液循環(huán)中腫瘤標(biāo)志物的濃度越高。 3．腫瘤組織的血液供應(yīng)好壞：若血液供應(yīng)差，血液循環(huán)中腫瘤標(biāo)志

5、物的濃度低。,4．腫瘤細(xì)胞是否有壞死和壞死的程度：腫瘤細(xì)胞壞死后，釋放出大量腫瘤標(biāo)志物，使腫瘤局部和血液中腫瘤標(biāo)志物的濃度升高。 5．腫瘤細(xì)胞的分化程度和腫瘤的分期：腫瘤細(xì)胞分化程度越差，惡性程度越高，越晚期，產(chǎn)生的腫瘤標(biāo)志物越多。,6．腫瘤細(xì)胞是否表達(dá)和合成腫瘤標(biāo)志物：有些腫瘤細(xì)胞不表達(dá)、不攜帶腫瘤標(biāo)志物，則在血液和體液中就檢測(cè)不到。 7．腫瘤標(biāo)志物在體內(nèi)的降解和排泄速度：若肝、腎功能差，排泄

6、速度慢，則腫瘤標(biāo)志物在體內(nèi)可異常升高。,四、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的影響因素,㈠ 分析前 1. 標(biāo)本采集對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響: ⑴ 前列腺按摩、前列腺穿刺、射精、導(dǎo)尿和直腸鏡檢查后，血液PSA和PAP值可升高(宜在此操作過后一周取樣）； ⑵ 肝、腎功能異常和膽道排泄不暢、膽汁淤滯等均可造成如CEA、ALP、GGT等濃度增高。,⑶ 某些藥物會(huì)影響腫瘤標(biāo)志物的濃度，如抗雄激素治療前列腺癌時(shí)可抑制PSA產(chǎn)生，導(dǎo)致PSA假陰性結(jié)果。⑷ 唾液和汗液

7、污染標(biāo)本可使鱗狀上皮細(xì)胞癌相關(guān)抗原（SCC）、CA 19-9濃度升高，CEA也會(huì)輕度升高。,2.標(biāo)本保存對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響: ⑴ 血液標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)離心，若從采血到血清分離的間隔時(shí)間﹥60min， NSE濃度會(huì)從血小板中釋放而增高；保存於4℃冰箱中，24小時(shí)內(nèi)測(cè)定；如在2～3個(gè)月內(nèi)測(cè)定，則應(yīng)-20℃保存，避免反復(fù)凍融。 ⑵ 酶類和激素類腫瘤標(biāo)志物不穩(wěn)定，易降解，應(yīng)及時(shí)測(cè)定或低溫保存。,⑶ 由于紅細(xì)胞和血小板中也存在神經(jīng)元特異性

8、烯醇化酶（NSE），因此，樣本溶血可使血液中NSE濃度增高（RBC中有大量的NSE，1%的溶血可使血清NSE升高5ug/L)。 黃疸血樣本，會(huì)引起PSA的檢測(cè)值升高。,㈡ 分析中 1.測(cè)定方法和試劑對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響： 從方法學(xué)來看，腫瘤標(biāo)志物測(cè)定方法很多，有放射免疫測(cè)定法，酶聯(lián)免疫測(cè)定法，化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法等，每種測(cè)定方法有自己的精密度和重復(fù)性，但手工操作的方法重復(fù)性較差，誤差比較大，操作時(shí)要特別認(rèn)真；用

9、自動(dòng)化儀器進(jìn)行測(cè)定，重復(fù)性好，誤差小。,有研究報(bào)道，使用12種不同的CEA試劑盒檢測(cè)某一混合血清中CEA的濃度，結(jié)果其差異超過100%。導(dǎo)致分析間誤差的主要原因是沒有測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)化，包括缺乏統(tǒng)一的抗原、抗原成分、校正品和參考方法等。因此，在工作中要盡量使用同一種方法，同一種儀器和同一廠家的試劑盒進(jìn)行測(cè)定。,2. 交叉污染對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響： 當(dāng)測(cè)定非常高濃度標(biāo)本時(shí)，交叉污染成為一個(gè)導(dǎo)致假陽性的潛在問題。所以應(yīng)不時(shí)地復(fù)查有無標(biāo)本被

10、交叉污染。,3. 嗜異性抗體對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響： 大多數(shù)腫瘤標(biāo)志物的測(cè)定中常使用一對(duì)鼠單克隆抗體來與腫瘤抗原反應(yīng)，如果病人血清中存在嗜異性抗體（特別是人抗鼠抗體），它可能在兩種鼠單克隆抗體間起“橋梁”作用，導(dǎo)致在無抗原的情況下，出現(xiàn)腫瘤標(biāo)志物濃度增高的假象。,㈢ 分析后： 1．參考值范圍：不同標(biāo)本如血液、尿液、胸、腹水等，必須有不同的參考值。 不同地區(qū)、不同人群、不同方

11、法、不同試劑和設(shè)備應(yīng)建立自己的參考值范圍。,治療,,0 1 2 3 4 5 6月,,2．病人基礎(chǔ)測(cè)定值的變化，對(duì)于結(jié)果的分析極有價(jià)值。故應(yīng)監(jiān)測(cè)病人治療前、治療中和治療后各個(gè)階段腫瘤標(biāo)志物含量的變化，最好畫一張腫瘤標(biāo)志物含量的變化的曲線圖，以便綜合分析。,3．一般病人的結(jié)果在排除檢測(cè)方法引起的誤差后，上升或下降25％都有臨床價(jià)值。對(duì)于測(cè)定結(jié)果特別異常的標(biāo)本必須復(fù)查，以防測(cè)定

12、誤差。 4．由于腫瘤標(biāo)志物測(cè)定其臨床意義的特殊性，必須加強(qiáng)與臨床的交流和溝通當(dāng)改變腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)方法和試劑時(shí)，必須通知臨床，否則會(huì)影響結(jié)果的判斷。,,5．必須知道腫瘤標(biāo)志物的半壽期（手術(shù)后降到一半所需的時(shí)間），這有助解釋某些腫瘤標(biāo)志物，如AFP和hCG 的濃度變化，對(duì)于臨床療效判斷有重要意義。,主要腫瘤標(biāo)志物經(jīng)手術(shù)后半壽期,,,,,五、腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合應(yīng)用,1.有關(guān)標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè) -- 提高特異性2.陽性標(biāo)志物動(dòng)態(tài)觀察

13、-- 提高準(zhǔn)確性,腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的目的是要達(dá)到腫瘤的早期診斷，早期治療，因此，希望找到特異性強(qiáng)，敏感性高的腫瘤標(biāo)志物。腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合應(yīng)用有助于提高檢測(cè)的敏感性。,一種腫瘤可分泌多種腫瘤標(biāo)志物，而不同的腫瘤或同種腫瘤的不同組織類型可有相同的腫瘤標(biāo)志物，而且在不同的腫瘤患者體內(nèi)，腫瘤標(biāo)志物的質(zhì)和量變化也較大。因此，單獨(dú)檢測(cè)一種腫瘤標(biāo)志物，可能會(huì)因?yàn)闇y(cè)定方法的靈敏度不夠而出現(xiàn)假陰性，聯(lián)合檢測(cè)多種腫瘤標(biāo)志物有利于提高檢出的陽性率。為此，選擇一

14、些特異性較高，可以互補(bǔ)的腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合測(cè)定，對(duì)提高腫瘤的檢出率是有價(jià)值的。,一個(gè)腫瘤細(xì)胞經(jīng)過10次分裂能增殖至103個(gè)細(xì)胞，達(dá)1ug重的微小病灶，再經(jīng)10次分裂，達(dá)106個(gè)腫瘤細(xì)胞，重約1mg。 用生物物理方法，如X線，CT和超聲等檢查，只有當(dāng)腫瘤大小至少到1～2cm時(shí)才能發(fā)現(xiàn)，而此時(shí)腫瘤細(xì)胞已達(dá)10億（109）甚至更多。 用免疫學(xué)方法檢測(cè)時(shí)，腫瘤細(xì)胞需達(dá)到1百萬個(gè)（106）才可檢出，但此時(shí)可能已經(jīng)發(fā)生腫瘤轉(zhuǎn)移，而且也

15、不是所有腫瘤在此時(shí)都能被檢出。,常用腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)的臨床應(yīng)用腫瘤 首選標(biāo)志物 補(bǔ)充標(biāo)志物 肺癌 CEA、NSE、CYFRA21-1 TPA、SCC、ACTH、降鈣素、TSA肝癌 AFP AFU、γGT、CEA、ALP乳腺癌 CA15-3、CEA

16、 CA549、hCG、降鈣素、鐵蛋白 胃癌 CA72-4 CEA、CA19-9、CA242前列腺癌 PSA、f-PSA PAP結(jié)腸直腸癌 CEA CA19-9、CA50 胰腺癌 CA19-9

17、 CA50、CEA、CA125 卵巢癌 CA125 、CA724 CEA、hCG、CA19-9 睪丸腫瘤 AFP、hCG宮頸癌 SCC CA125、CEA、TPA 膀胱癌 CYFRA21-1