磨盤草微量元素的初級形態(tài)分析

1、<p>　　磨盤草微量元素的初級形態(tài)分析</p><p>　　作者：張燕，張洪斌，陳忠蔭，林偉，胡海強</p><p>　　【摘要】 　　目的對磨盤草微量元素的初級形態(tài)進行分析。方法用電感耦合等離子體質(zhì)譜法測定了磨盤草中Ca，Mg，Zn，F(xiàn)e，Mn，Cu，Ni，Cr的含量，并進行了初級形態(tài)研究。結果初級形態(tài)結果表明，8種元素在原藥中的含量特征如下：Ca&gt;Mg&am

2、p;gt;Zn&gt;Fe&gt;Mn&gt;Cu&gt;Ni&gt;Cr；總提取率中Mg超過了50%，其次是Ni（39.05%），其他元素均在35%以下；各元素殘留率中，Zn、Cu、Ca的頭煎殘留率最高（86.48%，80.63%，80.54%)，Mg的頭煎殘留率最低(60.08%)；Cu的顆粒吸附率最高。結論為進一步探討磨盤草微量元素與藥效之間的關系提供了參考依據(jù)。 </p>&

3、lt;p>　　【關鍵詞】 磨盤草； 微量元素； 初級形態(tài)</p><p>　　Abstract：ObjectiveTo analyze the primary speciation of trace elements in Abutilon indicum (L.) Sweet. MethodsThe contents of Ca, Mg, Zn, Fe, Mn, Cu, Ni and Cr of Abu

4、tilon indicum (L.) Sweet were determined by ICP-MS，and their primary speciation was studied. ResultsThe results of primary speciation showed that the content characters of eight trace elements in primary sample were as f

5、ollows: Ca&gt;Mg&gt;Zn&gt;Fe&gt;Mn&gt;Cu&gt;Ni&gt;Cr. The total extraction rate of Mg was more than 50% , the next </p><p>　　Key words：Abutilon indicum (L.) Sweet; Trace elements

6、; Primary speciation</p><p>　　研究和開發(fā)中草藥內(nèi)的微量元素是現(xiàn)代中醫(yī)臨床的重要課題?，F(xiàn)代研究表明，中草藥中的微量元素的含量與形態(tài)影響其藥理、毒理、生物學活性和生物利用率［1］， 因此對元素作用的研究，不但要對元素的總量進行分析，更重要的是對元素的存在形態(tài)進行研究［2］。磨盤草Abutilon indicum (L.) Sweet為錦葵科苘麻屬植物，為一年生或多年生亞灌木狀草本，全

7、草入藥。甘淡平，疏風清熱、益氣通竅、祛痰、利尿，用于治療感冒、久熱不退、流行性腮腺炎、耳鳴、耳聾、肺結核、小便不利。全草含有萜類、甾類、酚類、黃酮苷、氨基酸、有機酸和糖等。生于砂地、曠野或路旁，分布于廣西、廣東、海南、貴州、云南、福建、臺灣等地［3］。目前對磨盤草的研究集中在藥理作用、化學成分方面［4，5］，而對磨盤草微量元素形態(tài)分析的研究未見報道。因此，本研究結合中草藥中微量元素形態(tài)分析的層次模式，用ICP-MS法對磨盤草的8種微量元

8、素進行了初級形態(tài)分析,計算了有關形態(tài)分析參數(shù)，為磨盤草藥效功能的進一步的開發(fā)與利用、探究微量元素的含量和形態(tài)與藥效之間的關系提供科學依據(jù)。</p><p><b>　　1 器材</b></p><p>　　1.1 儀器X7型電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(美國熱電公司)；1810-B型石英雙重純水蒸餾器（上海雷磁儀器廠）；FA1604型電子天平（上海天平儀器廠）；TG16

9、臺式高速離心機（湖南儀器儀表總廠離心機廠）；SKP-01電熱恒溫干燥箱（湖北省黃石市醫(yī)療器械廠）；0.45 μm濾膜（上海市新亞凈化器件廠）。</p><p>　　試驗中所用玻璃器皿均用10% HNO3浸泡清洗。</p><p>　　1.2 試劑HNO3，HClO4均為優(yōu)級純；實驗水均為二次蒸餾水；鎂、鈣、鐵、鋅、鉻、錳、鎳、銅標準儲備液(濃度均為100 mg·L-1)，使用時

10、配制至所需濃度。</p><p>　　1.3 材料磨盤草（采自五指山市文化村）,經(jīng)瓊州學院生命科學系林偉教授鑒定為磨盤草Abutilon indicum (L.) Sweet全草。</p><p><b>　　2 方法</b></p><p><b>　　2.1 樣品制備</b></p><p&g

11、t;　　2.1.1 干樣的制備 將磨盤草用二次蒸餾水洗凈，置于60℃烘箱中烘干至恒重，在藥物粉碎機上粉碎，過40目篩，得到原藥樣品。</p><p>　　2.1.2 煎液制備將原藥樣品準確稱取50 g（原藥A）置于燒杯中加二次蒸餾水250 ml，浸泡1 h，煮沸，然后用文火保持微沸40 min。稍冷，用4層紗布濾擰，再用約20 ml熱二次蒸餾水淋洗3次，濾液濃縮后定容于50 ml容量瓶中，得到頭煎殘渣B和相當

12、于原藥1.00 g·ml-1頭煎液C。</p><p>　　殘渣B烘干稱重，1/5留著用于直接測試的頭渣B試樣。另4/5加二次蒸餾水100 ml，煮沸，文火保持微沸30 min，用紗布過濾同前操作，得殘渣D及二煎液E。E濃縮定容于40 ml（E為相當于原藥1.00 g·ml-1二煎液）。將殘渣D烘干稱重，作為測定的二煎殘渣D試樣。</p><p>　　取C、E溶液各25

13、 ml，充分混勻，高速離心之后，離心液用0.45 μm微孔濾膜抽濾，濾液為F (相當于原藥0.50 g·ml-1 )，即可溶態(tài)。離心及濾膜上殘渣烘干，準確稱重，得到用于測試的顆粒物G試樣。</p><p><b>　　2.2 樣品分析</b></p><p>　　2.2.1 測定條件 以鎂、鈣、鐵、鋅、鉻、錳、鎳、銅等8種元素，濃度分別為0,20，50，

14、100 μg·l-1的混合標準系列溶液，按ICP-MS儀器的優(yōu)化工作參數(shù)(見表1)，測定信號強度，建立各元素的標準工作曲線。表1 ICP-MS工作參數(shù)（略）</p><p>　　2.2.2 樣品測定準確稱取原藥A、殘渣B、D、顆粒物G各0.5 g置于50 ml燒杯中，另取C10.00 ml、E10.00 ml分別濃縮至5ml。在A、B、D 和G，濃縮的C、E中分別加入混合酸(HNO3∶HClO4 =

15、 4∶1) 20 ml，放置過夜，在電爐上消化，加熱先產(chǎn)生棕色煙霧再蒸發(fā)至白煙冒盡，溶液澄清透亮近干，加入2%HNO3，冷卻，轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶中，定容備用。按工作條件用電感耦合等離子體質(zhì)譜法測定元素含量。</p><p><b>　　3 結果</b></p><p>　　3.1 分析方法的精密度和準確度采用ICP-MS建立的分析方法，標準曲線的線性相關系數(shù)為0

16、.999 7～1.000 0之間。該方法測定磨盤草中微量元素含量的RSD為0.3%～4.8%。該方法測定了國家一級標準物質(zhì)灌木枝葉（GBW07603）中微量元素含量，回收率在89.2%～110.6%之間。由此可見，實驗所建立的分析方法線性好，精密度高，可靠性好。表2 磨盤草浸出情況（略）</p><p>　　3.2 藥物浸出情況按初級形態(tài)分析流程得到的頭渣B、二渣D和顆粒物G烘干稱重，得到磨盤草浸出結果如表2

17、所示。其中：</p><p>　　頭煎浸出率(%) =（WA-WB）/ WA×100%</p><p>　　總浸出率(%)=(WA-WD)/WA×100%</p><p>　　3.3 初級形態(tài)分析</p><p>　　3.3.1 初級形態(tài)測定結果在測出磨盤草原藥中微量元素種類和含量的基礎上，再測定按初級形態(tài)分析流程制備

18、的試樣中各成分的含量。結果見表3。表3 初級形態(tài)分析測定結果（略）</p><p>　　3.3.2 形態(tài)分析參數(shù)根據(jù)周天澤對形態(tài)分析的探討［6］，各形態(tài)分析參數(shù)導出如下:令Wi、Pi(i=A、B......G)分別表示某級份的總重量及某元素在該級份中的含量。</p><p>　　頭煎提取率T1= (WC×PC)/(WA×PA)×100%；二煎提取率T2=

19、(WE×PE)/(WA×PA)×100%；頭煎殘留率L1= (WB×PB)/(WA×PA)×100%；二煎殘留率L2= (WD×PD)/(WA×PA)×100%；顆粒吸附率U=(WG×PG)/(WA×PA)×100%；總提取率T = T1+T2；頭煎浸留比Q1= T1/L1；二煎浸留比Q2= T2/L2；總浸留比Q =

20、 T/L2。</p><p>　　本實驗固體級份單位為g，液體級份體積以ml計，含量單位均為μg/g或μg/ml。同時根據(jù)物料平衡，T1+L1=T1+T2+L2=100%。由形態(tài)分析結果算出有關參數(shù)見表4。表4 初級形態(tài)分析參數(shù)（略）</p><p><b>　　4 討論</b></p><p>　　初級形態(tài)分析目的是探討中草藥服用劑型中哪

21、些元素在發(fā)揮作用。中藥水煎液(湯劑)是傳統(tǒng)常用劑型，水煎液中微量元素的含量才是實際服入的量，因此研究中藥水煎液中微量元素的存在形態(tài)對探討中藥真正的有效成分及藥理作用具有重要意義。從表3的結果可見，8種元素在原藥、渣和煎汁中的含量差別很大。其總含量特征如下：Ca&gt;Mg&gt;Zn&gt;Fe&gt;Mn&gt;Cu&gt;Ni&gt;Cr，說明中草藥中不同元素具有一定比例，處于

22、一個相對的元素平衡體系中。和原藥相比，除鎂外，其他元素頭渣和二渣的含量均大于原藥含量，表明這些元素以某種結合形態(tài)吸附在渣體中不易浸出，相應鎂更易浸出。在表3的結果中，所有元素的顆粒物濃度均較大，說明它們明顯吸附于膠體上。從顆粒物來看，鈣、鎂、鐵的濃度較高,可能與它們水解產(chǎn)生的沉淀吸附在顆粒上有關。</p><p>　　形態(tài)分析參數(shù)在于對形態(tài)作出定量的表征，反映某一元素在藥渣及煎汁中的不同分布，各參數(shù)中以提取率和浸

23、留比最重要。提取率表示該藥的實際服用部分，是其藥效或毒性的作用量，所以水煎液中微量元素提取率是制定中藥劑量或考察其毒性的重要依據(jù)。浸留比則為該元素發(fā)揮藥效的標度，浸留比最大的元素，可以認為是該藥中作用最大的元素［6］。表4表明，各元素頭煎提取率雖然都高于二煎提取率，但二煎提取率仍然較大，說明傳統(tǒng)中藥煎煮方式(一般為3次)是有其科學道理的。總提取率中只有Mg超過了50%，其次是Ni（39.05%），其它元素的提取率較低，小于35%。而各元

24、素殘留率中，Zn，Cu，Ca的頭煎殘留率最高，其次是Mn，F(xiàn)e，Cr，Ni， Mg的頭煎殘留率最低（60.08%），表明藥渣中還有相當多可再利用的微量元素。鎂的浸留比最大，說明這8種元素中鎂為作用最大元素或是最特征的元素。顆粒吸附率最大的是銅，其次是錳、鐵，可能與其水解有關。</p><p>　　研究磨盤草微量元素的初級形態(tài)，可為進一步探討磨盤草微量元素與藥效之間的關系提供依據(jù)。</p><p

25、><b>　　【參考文獻】</b></p><p>　?。?］弓曉峰，謝明勇，楊妙峰，等.黑靈芝中微量元素的形態(tài)分布［J］.理化檢驗·化學分冊，2005，41（7）：461.</p><p>　　［2］胡雪梅，郭榮輝，李 暉. 川芎中鋅、錳、鐵、鈣、鎂元素的次級形態(tài)分析［J］.微量元素與健康研究, 2005, 22(1): 16.</p>

26、<p>　?。?］中華本草編委會. 中華本草（第14卷）［M］. 上海：上海科學技術出版社，1999：336.</p><p>　　［4］劉娜，賈凌云，孫啟時. 中藥磨盤草的化學成分［J］.沈陽藥科大學學報，2009，26(3):196.</p><p>　?。?］Matlawska I，Sikorska M. Flavonoid compounds in the flower