17株水產(chǎn)動物病原菌的鑒定.pdf

1、安徽是中國淡水養(yǎng)殖大省,但長期以來水產(chǎn)動物病原學(xué)研究比較落后,魚、鱉、蟹等水產(chǎn)動物的細菌性傳染病常有發(fā)生,成為制約水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的重要因素.近年來,該實驗室先后從省內(nèi)養(yǎng)殖場發(fā)病魚、鱉、蟹等水產(chǎn)動物體內(nèi)分離到17株細菌.經(jīng)過初步的常規(guī)鑒定,已確定了其中部分細菌的種屬.為全面了解安徽省水產(chǎn)動物病原流行病學(xué)基本狀況,提供防治水產(chǎn)動物傳染病的科學(xué)依據(jù)以及為深入研究病原菌的致病機理奠定基礎(chǔ),該課題對17株細菌的致病性、形態(tài)學(xué)、生理生化特性和分子遺

2、傳學(xué)特性等進行了系統(tǒng)研究.首先,應(yīng)用動物試驗對細菌進行了致病性測定.其次,對17株細菌進行了形態(tài)學(xué)和生理生化特性表型鑒定.通過涂片、革蘭氏染色、光鏡下檢查,顯示所有待鑒定細菌均為革蘭氏陰性桿菌.再次,通過測定DNA G+Cmol﹪含量對17株病原菌進行了分子遺傳學(xué)鑒定.為獲得最佳實驗條件和可靠的實驗數(shù)據(jù),以標(biāo)準(zhǔn)株大腸桿菌K<,12>為材料,建立和優(yōu)化了測定G+Cmol﹪含量的Tm法.由于破碎細菌細胞壁是提取DNA的關(guān)鍵,間接影響DNAG

3、+Cmol﹪含量的測定值.因此,研究中比較了SU法(SDS+超聲波)、ES法(溶菌酶+SDS)和ESU法(溶菌酶+SDS+超聲波)破碎大腸桿菌K<,12>細胞壁在提取染色體DNA和測定G+Cmol﹪含量中的效果.綜上所述,該研究應(yīng)用API/ATB半自動化細菌鑒定系統(tǒng)和Tm法測定了17株病原菌的生理生化指標(biāo)和細菌染色體DNA G+Cmol﹪含量,兩者結(jié)果與《伯杰氏細菌鑒定手冊》(第九版)所描述的細菌特性基本相符,從而確立了17株病原菌的種

4、屬,它們分布于氣單胞菌屬(Aeromonas)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、不動桿菌屬(Acinetobacter)、摩根氏菌屬(Morganella)、弧菌屬(Vibrio)和變形桿菌屬(Proteus)6個菌屬,其中BA<,1>、BA<,3>、BA<,11>HX<,6>和J<,23>5株細菌為嗜水氣單胞菌(A.hydrophila),BA<,15>、BA<,16>和MA<,1>3株細菌為溫和氣單胞菌(A.sobria),H