甘藍(lán)根腫病病原菌鑒定與抗源材料篩選.pdf

1、甘藍(lán)根腫病，是一種危害嚴(yán)重的土傳病害，最早的記載出現(xiàn)于13世紀(jì)，其病原則發(fā)現(xiàn)于1878年，由俄國學(xué)者woronin命名為蕓薹根腫菌(Plasmodiophora brassicae Woronin)。該病害在世界范圍內(nèi)均有分布，近年來，甘藍(lán)根腫病在我國發(fā)生面積劇增，抗源材料的篩選與抗病品種的選育已成為急需解決的問題。東北農(nóng)業(yè)大學(xué)甘藍(lán)育種研究室于2013年9月，在甘藍(lán)育種基地發(fā)現(xiàn)一種疑似甘藍(lán)根腫病的病害，由于此前在哈爾濱并未見有該病害的發(fā)

2、生報道，因此本研究從病原菌鑒定入手，主要采取傳統(tǒng)的形態(tài)分類學(xué)鑒定方法與ITS序列比對的分子生物學(xué)方法相結(jié)合的手段，鑒定了此次發(fā)現(xiàn)的新病害的病原菌為蕓薹根腫菌;此后，對病原菌的生物學(xué)特性進(jìn)行了研究;在此基礎(chǔ)上，試驗(yàn)篩選出了一套簡單快捷的甘藍(lán)根腫病苗期抗性鑒定方法，并對東北農(nóng)業(yè)大學(xué)甘藍(lán)育種研究室提供的20份甘藍(lán)材料進(jìn)行了苗期抗性鑒定，為今后的甘藍(lán)抗根腫病育種工作奠定堅(jiān)實(shí)的理論和實(shí)踐基礎(chǔ)，主要研究結(jié)果如下:
　　(1)對哈爾濱地區(qū)甘藍(lán)發(fā)

3、生的根部腫大、地上部不能形成葉球的新病害進(jìn)行了鑒定，通過形態(tài)學(xué)觀察，致病力測定，初步確定該病是由蕓薹根腫菌侵染引起的甘藍(lán)根腫病。隨后利用根腫菌的rDNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(internal transcribed spacer, ITS)的保守性和變異性，用根腫菌ITS區(qū)段特異性引物對病原菌DNA進(jìn)行了PCR擴(kuò)增，并將測序結(jié)果在GenBank中進(jìn)行同源性比對分析，分子鑒定與形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果表現(xiàn)一致。
　　(2)明確了甘藍(lán)根腫病病原菌的基本

4、生物學(xué)特性:發(fā)病甘藍(lán)腫根腐爛處理利于該病原菌休眠孢子的萌發(fā)，腫根冷凍處理對休眠孢子萌發(fā)率影響不大;休眠孢子萌發(fā)的最適培養(yǎng)基質(zhì)是感病甘藍(lán)根分泌溶液，最佳萌發(fā)pH條件為6.0，最適宜萌發(fā)溫度24℃;光照對休眠孢子的萌發(fā)有抑制作用，休眠孢子的致死溫度為44℃。
　　(3)試驗(yàn)分別比較了不同接種方法、不同接種濃度以及在不同土壤pH條件下人工接種甘藍(lán)根腫病后甘藍(lán)的發(fā)病情況，篩選出一套甘藍(lán)根腫病苗期抗性鑒定與評價的最佳接種方法:即采用菌土法，