miR-155抑制物對骨肉瘤細胞系SOSP-9607細胞生物學(xué)特性的影響.pdf

1、背景:
　　骨肉瘤作為最常見的原發(fā)性惡性成骨性腫瘤,其侵襲能力強且有早期轉(zhuǎn)移傾向。骨肉瘤多發(fā)生于兒童和青少年,其最常見的原發(fā)部位為股骨遠端、脛骨近端及肱骨近端,其中一半始于膝關(guān)節(jié)周圍,嚴重影響機體功能。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展,在骨肉瘤的治療中,盡管出現(xiàn)了外科保肢技術(shù)和聯(lián)合化療方案等新的綜合治療方案,但其5年生存率仍只有65-70％。在過去的20多年,骨肉瘤的治療進入了瓶頸期,骨肉瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移問題始終未得到解決。鑒于骨肉瘤現(xiàn)狀,我們急

2、需找到新的有前景的骨肉瘤治療手段。
　　MicroRNAs(miRNAs)作為一類真核生物體內(nèi)具有調(diào)控功能的非編碼小RNA,它們能在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因表達,miRNAs被報道在許多腫瘤中表達異常,且異常表達的miRNAs與腫瘤的進展密切相關(guān)。根據(jù)miRNAs在腫瘤中的不同作用,它們被人為分成“癌基因”和“抑癌基因”兩大類。作為 miRNAs家族成員,miR-155在許多腫瘤中過表達,且過表達的miR-155在這些腫瘤的進展中起到“

3、癌基因”作用。本實驗室在行骨肉瘤SOSP-9607細胞系 miRNAs克隆時,檢測到miR-155存在,提示miR-155在骨肉瘤中也可能存在促進作用。
　　目的:
　　觀察miR-155抑制物對骨肉瘤細胞系SOSP-9607細胞增殖、侵襲、遷移、周期和凋亡的影響。
　　方法:
　　1.實驗分為3組:實驗組、陰性對照組和空白對照組。實驗組轉(zhuǎn)染miR-155抑制物來抑制miR-155的功能。
　　2.MTT和

4、CCK-8實驗測定3組細胞24、48、72和96小時OD值,并繪制成生長曲線。
　　3.Transwell實驗測定3組細胞的侵襲和遷移能力。
　　4.流式細胞儀觀察3組細胞的周期和凋亡變化。
　　結(jié)果:
　　1.MTT和CCK-8實驗結(jié)果顯示:兩對照組間細胞增殖能力未見明顯差異;而相對于對照組,實驗組細胞增殖能力明顯下降(P<0.01)。
　　2.Transwell實驗結(jié)果顯示:兩對照組間細胞侵襲和遷移能力

5、未見明顯差異;而相對于對照組,實驗組細胞侵襲和遷移能力明顯下降(P<0.05)。
　　3.流式細胞儀周期結(jié)果顯示:與對照組相比,實驗組細胞 G0/G1期細胞比率明顯增高,而S期和G2期細胞比率明顯降低(P<0.01);而兩對照組間細胞的周期分布未見明顯差異。
　　4.流式細胞儀凋亡結(jié)果顯示:實驗組細胞凋亡率(8.5±0.4)%較陰性對照組凋亡率(1.2±0.3)%和空白對照組凋亡率(1.1±0.2)%明顯增高(P<0.01)