LY294002對(duì)骨肉瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及其機(jī)制的體外研究.pdf

1、目的:
　　探討PI3K抑制劑LY294002對(duì)骨肉瘤細(xì)胞U2OS和MG63增殖、凋亡、侵襲、遷移的影響及其作用的分子機(jī)制。
　　方法:
　　使用梯度濃度的LY294002對(duì)骨肉瘤細(xì)胞U2OS和MG63進(jìn)行干預(yù),MTT檢測(cè)細(xì)胞在不同時(shí)間(24、48和72 h)的增殖情況,并分別測(cè)得兩細(xì)胞株處理24h后的半數(shù)抑制率時(shí)的藥物濃度(IC50值);流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)U2OS凋亡情況。在低于IC50濃度的情況下,劃痕愈合和trans

2、well侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移、侵襲能力; RT-PCR和 Western blot檢測(cè)不同濃度的 LY294002對(duì)PI3K/AKT/FASN信號(hào)通路的影響。
　　結(jié)果:
　?、倥c對(duì)照組相比,不同濃度的LY294002(5、10、20、40、80、160μM)對(duì)骨肉瘤細(xì)胞U2OS和MG63增殖均有抑制作用,并且隨著作用時(shí)間的延長(zhǎng),抑制率升高。此外,測(cè)得處理24h后的IC50值,U2OS細(xì)胞為62.98μM,MG63細(xì)胞為55

3、.2μM。
　　②與對(duì)照組相比,不同濃度的LY294002(20、40、80、160μM)均可促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞U2OS和MG63凋亡,且濃度越高,細(xì)胞凋亡率越高。
　?、叟c對(duì)照組相比,不同濃度的LY294002(20、40μM)均可抑制骨肉瘤細(xì)胞U2OS和MG63侵襲和轉(zhuǎn)移,并且濃度越高其抑制作用越強(qiáng)。
　?、躄Y294002抑制PI3K/AKT/FASN信號(hào)通路中各蛋白的表達(dá)和FASN轉(zhuǎn)錄水平(mRNA)的表達(dá),并且隨