姜黃素與四氫姜黃素對(duì)實(shí)驗(yàn)性脂肪肝的干預(yù)作用.pdf

1、目的： 通過(guò)復(fù)合方式建立脂肪肝體外模型和動(dòng)物模型，觀察并探討姜黃素和四氫姜黃素對(duì)體內(nèi)外脂肪肝模型的干預(yù)作用。 方法： (1)采用0.8％乙醇和5μg/ml軟脂酸共同作用于人正常肝細(xì)胞株LO2的復(fù)合方式在體外建立脂肪肝細(xì)胞模型，并應(yīng)用MTT法篩選姜黃素及四氫姜黃素作用于肝細(xì)胞的適合濃度，經(jīng)油紅O染色，觀察不同給藥組細(xì)胞內(nèi)脂滴形成情況，并檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)甘油三酯(TG)水平變化。從而觀察姜黃素及四氫姜黃素在體外抗脂肪肝的作

2、用效果。 (2)通過(guò)給予高脂飼料、30％L醇灌胃、40％CCl4葵花籽油溶液皮下注射的復(fù)合方式建立小鼠脂肪肝的模型，同時(shí)給予不同劑量的姜黃素和四氫姜黃素固體分散劑，于實(shí)驗(yàn)第16天，取血及肝組織，計(jì)算肝指數(shù)、檢測(cè)血脂：血清TG、CHO、LDL-C，肝臟內(nèi)脂質(zhì)：肝勻漿TG、CHO、LDL-C，以及觀察肝臟病理組織形態(tài)學(xué)改變。從而觀察姜黃素及四氫姜黃素固體分散劑在小鼠體內(nèi)抗脂肪肝的療效。 結(jié)果： 1. (1)通

3、過(guò)MTT法篩選出姜黃素的作用濃度為2.5μM、5.0μM、10μM，四氫姜黃素的作用濃度為5.0μM、10μM、20μM、25μM； (2)油紅O染色后，在光鏡下觀察發(fā)現(xiàn)：模型組細(xì)胞內(nèi)有大量的桔紅色或紅色脂滴積聚，而空白對(duì)照組LO2細(xì)胞幾乎未發(fā)現(xiàn)脂滴的存在。姜黃素及四氫姜黃素隨著作用濃度的增加細(xì)胞內(nèi)的脂滴逐漸減少； (3)根據(jù)油紅O染色的結(jié)果，選擇姜黃素10μM組及四氫姜黃素25μM給藥濃度進(jìn)一步通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)TG的變化

4、以便更客觀地說(shuō)明姜黃素及四氫姜黃素抗脂肪肝的作用效果，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)：模型組與空白對(duì)照組相比，細(xì)胞內(nèi)TG含量顯著增加(P<0.01)。與模型組相比，姜黃素10μM組及四氫姜黃素25μM組均能顯著地降低細(xì)胞內(nèi)TG的含量，分別下降了25.6％、41.3％(P<0.05)。 2. (1)通過(guò)給予高脂飼料、30％乙醇灌胃、40％CCl4葵花籽油溶液皮下注射的復(fù)合方式成功建立了小鼠脂肪肝的模型，與正常組相比，模型組小鼠的肝濕重、肝指

5、數(shù)、血清TG、CHO、LDL-C以及肝勻漿TG、CHO、LDL-C均顯著升高(P<0.01)。肝臟病理組織也證實(shí)其發(fā)生了彌漫性的脂肪肝病變； (2)不同劑量姜黃素固體分散劑給藥組與模型組相比，隨著給藥劑量的增加，對(duì)于血清以及肝勻漿中TG、CHO、LDL-C的含量均有不同程度的降低，其中血清TG、CHO以及肝勻漿TG、LDL-C的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。病理組織學(xué)檢查也有改善，其中姜黃素300mg/kg組的作用最為顯著； (3

6、)與模型組相比，隨著四氫姜黃素固體分散劑的濃度的增加，其降低肝濕重、肝指數(shù)、血清及肝勻漿中的TG、CHO、LDL-C作用也出現(xiàn)劑量依賴(lài)性增強(qiáng)。除了肝濕重和病理組織改變外，四氫姜黃素300mg/kg組對(duì)各指標(biāo)的改善均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論： 1.姜黃素及四氫姜黃素能防治由0.8％乙醇和5μg/ml軟脂酸誘導(dǎo)的體外脂肪肝，有效地減少細(xì)胞內(nèi)脂滴的形成和甘油三酯的蓄積。 2.姜黃素及四氫姜黃素固體分散劑對(duì)由高脂飼料喂養(yǎng)、