鼠抗人纖維蛋白單鏈抗體的二次人源化及人源化抗體的體外成熟.pdf_第1頁
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1、ScFvA11是該實驗室利用噬菌體表面呈現(xiàn)技術篩選到一株對人纖維蛋白特異的鼠單鏈抗體,而且以該鼠抗體為基礎,構建和表達了單鏈抗體-低分子量尿激酶融合基因.動物試驗表明,在達到相同的溶栓效果時,單鏈抗體-尿激酶融合蛋白的用量只是尿激酶且量的1/4,顯示該融合蛋白具有較好的體內導向溶栓效果,有很好的應用前景.為降低鼠抗體的免疫原性,該實驗室已采用表面重塑(surface reshaping)的人源化方案對該鼠抗體進行了第一次人源化.第一次人

2、源化后,人源化抗體重鏈框架區(qū)與人源性抗體模板(HSVHIF)的同源性達到86﹪,人源化抗體輕鏈框架區(qū)與人源性抗體模板(KV3L-H)的同源性達到75﹪,經在大腸桿表達和對表達產物的純化及活性分析,結果表明人源化單鏈抗體具有與親本鼠抗體相擬的體外活性.在該研究中,為了進一步提高人源化抗體輕鏈的人源化程度,在對鼠單鏈抗體的結構進行分子模建的基礎上,參照大量成功人源化的實例對該鼠抗體輕鏈進行了第二次人源化.二次人源化之后,輕鏈框架區(qū)與人源性模

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