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1、目的:探討泡球蚴囊液對(duì)大鼠肝星狀細(xì)胞絲裂素活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinas,MAPK)信號(hào)通路的影響。
方法:采用大鼠肝星狀細(xì)胞HSC-T6與不同蛋白濃度的泡球蚴囊液共培養(yǎng),共11組,濃度分別為13.5mg/mL的泡球蚴囊液原液,6.8mg/mL、3.4mg/mL、1.7mg/mL、0.9mg/mL、0.4mg/mL、0.2mg/mL、0.1mg/mL、0.05mg/mL、0.025
2、mg/mL、0.01mg/mL。培養(yǎng)24h后收集細(xì)胞,同時(shí)收集對(duì)照組(無(wú)泡球蚴囊液干預(yù))細(xì)胞。利用熒光實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)ERK1/2、JNK1/2和p38MAPK的變化。
結(jié)果:泡球蚴原囊液與HSC共培養(yǎng)24h后大部分細(xì)胞發(fā)生固縮,呈脫落前兆;1/2原囊液組部分細(xì)胞固縮,呈脫落前兆,而部分HSC-T6細(xì)胞收縮成長(zhǎng)梭形,細(xì)胞生出許多細(xì)長(zhǎng)的偽足,是正常狀態(tài)的2倍以上;1/4原囊液組部分細(xì)胞呈收縮的長(zhǎng)梭形,生出許多細(xì)長(zhǎng)的偽足,但大部
3、分細(xì)胞仍呈現(xiàn)為貼壁的胞體較大的不規(guī)則多邊形,且伸出較短的偽足與其他細(xì)胞連接成片狀;1/8原囊液以下組與空白對(duì)照組細(xì)胞從形態(tài)上則無(wú)差異。
實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)顯示ERK1/2、JNK1/2和p38MAPK mRNA水平在泡球蚴囊液>0.4mg/mL時(shí)顯著增加,在6.8mg/mL時(shí)相對(duì)于對(duì)照組高表達(dá),與對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0.05)。
結(jié)論:不同濃度泡球蚴囊液均可通過(guò)與大鼠肝星狀細(xì)胞表面受體結(jié)合激活大鼠肝星狀細(xì)胞MA
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