阿爾茨海默病的表觀遺傳學研究.pdf

1、阿爾茨海默病(Alzheimer disease，AD)是最為常見的老年期神經(jīng)變性疾病之一，其主要病理學特征為神經(jīng)炎斑塊(neuritic plaques，NP)形成、神經(jīng)原纖維纏結(neurofibrillary tangles，NFTs)和神經(jīng)元大量丟失。環(huán)境因素顯著的影響了阿爾茨海默病的發(fā)病，越來越多的證據(jù)表明經(jīng)歷卒中和腦缺血疾病的病人更容易患阿爾茨海默病，然而低氧促進阿爾茨海默病起病的具體分子機制一直沒有得到很好的解決。前面我們

2、已經(jīng)闡明低氧可以通過增強β-分泌酶和γ-分秘酶的活性顯著的促進AppSwe/PS1A246E轉基因小鼠Aβ的生成。在這部分研究里我們探討組蛋白去乙酰化酶抑制劑丙戊酸鈉減輕產(chǎn)前低氧的AppSwe/PS1A246E轉基因小鼠Aβ沉積和認知功能障礙的分子機制；低氧在原代培養(yǎng)的神經(jīng)元上通過組蛋白乙?；揎棥⒔M蛋白甲基化修飾下調Aβ降解酶NEP表達的主要分子機制。
　　 第一部分：產(chǎn)前低氧對APPSwe/PS1A246E轉基因小鼠表觀遺傳

3、影響并促進阿爾茨海默病發(fā)病的機制
　　 在這部分研究里，為了闡明AppSwe/PS1A246E轉基因小鼠產(chǎn)前低氧通過表觀遺傳學修飾影響學習記憶和神經(jīng)病理學變化的主要分子機制，我們將懷孕的AppSwe/PS1A246E轉基因小鼠在出生前7-20天給予模擬5000 m高原的低壓氧干預，每天低氧2 h。我們的研究主要集中在三個方面：(1)產(chǎn)前低氧誘導的Aβ代謝，老年斑，學習記憶功能，以及Aβ代謝相關蛋白的表達變化；(2)產(chǎn)前低氧誘導的

4、表觀遺傳學修飾在APPSwe/PS1A246E轉基因小鼠的神經(jīng)病理學變化主要集中在組蛋白乙?；降淖兓稀?br>　　 第二部分：丙戊酸鈉對產(chǎn)前低氧的APPSwe/PS1A246E轉基因小鼠表觀遺傳的調節(jié)機制
　　 組蛋白去乙?；敢种苿┍焖徕c減輕低氧誘導的Aβ沉積，減輕認知功能障礙；丙戊酸鈉預防低氧誘導的Aβ降解酶NEP的蛋白表達下調；丙戊酸鈉通過抑制組蛋白去乙?；富钚?，下調與NEP啟動子區(qū)結合組蛋白乙酰化水平。這部分

5、的研究結果表明低氧誘導Aβ降解酶NEP的蛋白表達下調，導致APPSwe/PS1A246E轉基因小鼠Aβ沉積和認知功能障礙的加重，而丙戊酸鈉通過上調NEP減輕產(chǎn)前低氧的APPSwe/PS1A246E轉基因小鼠Aβ沉積和認知功能障礙。
　　 第三部分低氧在小鼠原代培養(yǎng)的皮層和海馬神經(jīng)元上通過組蛋白修飾誘導NEP下調的機制
　　 在這部分研究里我們主要探討低氧誘導Aβ降解酶NEP下調的分子機制。我們發(fā)現(xiàn)低氧處理顯著的誘導小鼠原

6、代培養(yǎng)的皮層和海馬神經(jīng)元中NEP的蛋白和mRNA的下調。染色質免疫沉淀技術結合實時定量PCR技術發(fā)現(xiàn)低氧處理后與NEP啟動子區(qū)結合的組蛋白3的9位賴氨酸二甲基化水平升高，組蛋白3乙酰化水平降低。同時我們發(fā)現(xiàn)低氧顯著的上調了組蛋白甲基化轉移酶G9a和組蛋白去乙?；窰DAC1的表達水平。甲基化酶抑制劑5-氮雜-2-脫氧胞苷(5-Aza)和組蛋白去乙?；副焖徕c(Valproate，VA)，以及針對組蛋白甲基化轉移酶G9a和組蛋白去乙?；?/p>