針刺調控胃動力作用中Cajal細胞生物學改變及其部分細胞信號轉導途徑研究.pdf

1、現(xiàn)代大量研究均表明，胃經(jīng)穴位電針對胃腸功能有良好的調整作用，但其確切機制仍未完全闡明。進一步闡明電針足三里穴對胃運動、胃電雙向調節(jié)的發(fā)生機制，對指導臨床治療具有重要的意義。本實驗在電針大鼠足三里穴情況下，在觀察胃電圖變化的基礎上，研究針刺足三里穴引起胃電起搏區(qū)Cajal間質細胞（interstitialcellsofcajal,ICCs)的變化及與ICCs信息傳遞密切相關的縫隙連接蛋白43(CX43)的變化、絲裂原活化蛋白激酶（MAPK

2、）家族中的ERK的變化情況，并同步采用基因芯片技術，研究電針大鼠足三里穴引起信號轉導通路及標志基因的變化，為探討電針對胃運動的調節(jié)作用機制提供全新的理論依據(jù)。
　　方法：①將大鼠隨機分成足三里組、非經(jīng)非穴組、非針刺組，采用電生理學方法同步觀察電針后胃電的變化；②采用免疫組化熒光雙重標記ICCs與CX43、ICCs與ERK的方法，觀察針刺足三里穴引起胃電起搏區(qū)ICCs的變化、與ICCs信息傳遞相關的CX43的變化、絲裂原活化蛋白激酶

3、（MAPK）家族中的ERK的變化情況；③采用基因芯片技術，按TRIZOL法抽提三個胃組織標本總RNA，經(jīng)純化、逆轉錄合成摻入生物素標記的cRNA合成探針，與美國SuperArray公司的OligoGEArray基因芯片雜交，掃描芯片熒光信號圖像，計算機分析，比較基因及信號轉導通路差異。
　　結果：
　　1.電針足三里穴對胃電有明顯影響。電針足三里穴可使胃電頻率及波幅增高，提示電針足三里穴對胃動力有明顯促進作用。
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4、.電針足三里穴可顯著激活胃肌間和肌層ICCs表達,及與ICCs信息傳遞密切相關CX43的表達；電針足三里穴能促進肌間和肌層與ICCs調節(jié)胃運動的細胞信號轉導之MAPK途徑中ERK的上調表達。
　　3.篩選出與針刺作用相關的標志基因及信號轉導通路。三個標本中，電針足三里組明顯差異表達的標志基因hoxa1、lep、bcl-2上調，分屬于維甲酸通路、胰島素通路、Survival通路、雌激素通路、磷脂酶C通路；電針足三里組明顯差異表達的標

5、志基因ptgs2下調，屬于磷脂酶C通路。其中l(wèi)ep基因的上調表達，與ICCs的激活呈正相關關系，而ptgs2基因的下調表達與ICCs的激活呈負相關關系，可能在胃運動功能調節(jié)過程中發(fā)揮作用。
　　結論：電針足三里穴對大鼠胃電具有明顯的促進作用；電針足三里穴促進胃運動的機制可能通過激活ICCs而產(chǎn)生顯著電生理活動、通過ICCs及SMC之間的縫隙連接蛋白傳遞達到平滑肌進而調節(jié)胃運動。這一作用的完成，可能是通過ICCs信號轉導MAPK途徑