高血壓繼發(fā)左心室肥厚的分子遺傳學(xué)研究.pdf

1、第一部分： 研究背景: 左心室肥厚(LVH)是心血管疾病發(fā)病率和死亡率的獨(dú)立預(yù)測(cè)危險(xiǎn)因素。目前已知年齡、性別、絕經(jīng)、生活方式與糖尿病等均是LVH的重要危險(xiǎn)因素。雖然高血壓的主要并發(fā)癥是LVH，但是高血壓繼發(fā)LVH的患者其LVH的程度與高血壓病史的長(zhǎng)短、血壓水平及降壓后肥厚逆轉(zhuǎn)的程度并不呈比例，提示有高血壓以外的因素參與心肌肥厚進(jìn)程。研究表明，遺傳因素對(duì)左心室重量的影響約占非血壓因素的60％。內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)

2、可催化L—精氨酸生成NO，NO/NOS途徑參與心肌肥厚的病理、生理過程。在動(dòng)物模型中，長(zhǎng)期給予NOS抑制劑(L—NAME)或者NOS3—/—小鼠均會(huì)出現(xiàn)LVH、心肌纖維化和心功能異常；建立NOS3—/—小鼠主動(dòng)脈弓縮窄(TAC)壓力超負(fù)荷左心室肥厚的動(dòng)物模型，向心臟內(nèi)注射eNOS后可以緩解LVH以及由此導(dǎo)致的心功能異常。此外，eNOS還可以抑制心梗后小鼠的心肌肥厚，保護(hù)其心臟的功能。心衰病人心室肌中eNOS基因(NOS3)的表達(dá)是增加的

3、。關(guān)于NOS3與高血壓繼發(fā)LVH的關(guān)聯(lián)研究目前僅一篇報(bào)道，其結(jié)果表明NOS3基因多態(tài)性與左室肥厚相關(guān)聯(lián)。但是這種關(guān)聯(lián)在其他人群中尚未得到證實(shí)。 研究目的: 本研究擬在中國人群中驗(yàn)證NOS3多態(tài)性與高血壓繼發(fā)左心室肥厚的關(guān)聯(lián)。 對(duì)象和方法: 本研究選擇兩個(gè)獨(dú)立的高血壓繼發(fā)左室肥厚的病例和對(duì)照人群(2179和343人)，采用聚合酶鏈反應(yīng)—限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR—RFLP)法研究eNOS基因的三個(gè)功能性多

4、態(tài)性位點(diǎn)(-T786C/rs2070744、eNOS4a/b和+G894T/rs1799983)多態(tài)性與原發(fā)性高血壓繼發(fā)左室肥厚遺傳易感因素的關(guān)系。所有入選者均進(jìn)行心臟超聲的檢測(cè)。 研究結(jié)果: 結(jié)果顯示只有+G894T(Glu298Asp)位點(diǎn)與高血壓繼發(fā)左室肥厚的易感相關(guān)(第一個(gè)人群：OR=1.67，95％CI：1.19—2.36，P<0.05；第二個(gè)人群：OR=1.41，95％CI：1.01—2.28，P<0.05)

5、，并呈隱性遺傳模式。在兩個(gè)獨(dú)立樣本中，與攜帶G等位基因(GT+GG)的相比，攜帶TT基因型的患者的室間隔厚度、左室后壁厚度、左室重量指數(shù)和相對(duì)室壁厚度均增加(分別增加16.2％和11.7％、8.3％和7.1％、14.0％和25.1％、13.1％和16.2％)且均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 結(jié)論: eNOS基因+G894T多態(tài)可能是高血壓繼發(fā)左室肥厚遺傳易感性的標(biāo)記之一。這為高血壓繼發(fā)左室肥厚遺傳易感性提供了循證醫(yī)學(xué)依

6、據(jù)，同時(shí)也為在中國開展+G894T多態(tài)性與高血壓繼發(fā)左室肥厚關(guān)系的研究提供了基礎(chǔ)。 第二部分： 研究背景: 左心室肥厚(LVH)是心血管疾病發(fā)病率和死亡率的獨(dú)立預(yù)測(cè)危險(xiǎn)因素。目前已知年齡、性別、絕經(jīng)、生活方式與糖尿病等均是LVH的重要危險(xiǎn)因素。雖然高血壓的主要并發(fā)癥是LVH，但是高血壓繼發(fā)LVH的患者其LVH的程度與高血壓病史的長(zhǎng)短、血壓水平及降壓后肥厚逆轉(zhuǎn)的程度并不呈比例，提示有高血壓以外的因素參與心肌肥厚進(jìn)程

7、。研究表明，遺傳因素對(duì)左心室重量的影響約占非血壓因素的60％。非對(duì)稱性二甲基精氨酸(ADMA)是一種內(nèi)源性一氧化氮和酶(NOS)的抑制劑，研究顯示ADMA與左心質(zhì)量呈顯著正相關(guān)，與射血分?jǐn)?shù)呈顯著負(fù)相關(guān)。NO可以調(diào)節(jié)心肌的生長(zhǎng)，ADMA/NO途徑對(duì)于心肌肥厚的病理過程是重要的。二甲基精氨酸—二甲胺水解酶(DDAH2)存在于表達(dá)內(nèi)皮型一氧化氮合酶的組織中，可以代謝大部分的ADMA。關(guān)于DDAH2與高血壓繼發(fā)LVH的關(guān)聯(lián)研究目前還沒有相關(guān)報(bào)道

8、。 研究目的: 本研究擬在大樣本人群中研究DDAH2多態(tài)性與高血壓左心室肥厚的關(guān)聯(lián)性。 對(duì)象和方法: 研究對(duì)象為河南信陽高血壓基地收集的2，274例高血壓患者，其中包括1，135例高血壓伴L(zhǎng)VH患者，1，139例高血壓不伴有LVH患者及767例健康對(duì)照者。所有入選者均進(jìn)行心臟超聲的檢測(cè)。使用單倍體型-Tagging—SNPs的方法，研究DDAH2基因tagSNPs與原發(fā)性高血壓繼發(fā)左室肥厚遺傳易感因素的關(guān)

9、系。并進(jìn)一步運(yùn)用螢光素酶分析研究DDAH2變異對(duì)基因表達(dá)的影響效應(yīng)。 研究結(jié)果: 本研究發(fā)現(xiàn)DDAH2只有一個(gè)tag—SNP，是位于啟動(dòng)子區(qū)的變異—449C/G(rs805305)，其與其他SNPs(rs707916，rs805304)完全連鎖。對(duì)于—449C/G變異，與攜帶GG基因型的患者相比，攜帶C等位基因(GC+CC)的高血壓左室肥厚患者的左室重量指數(shù)(62.0±15.7g/m2.7vs．59.9±13.1g/m2

10、.7，P<0.05)、左室后壁厚度(62.0±15.7g/m2.7，vs．59.9±13.1g/m2.7，P<0.05)以及相對(duì)室壁厚度(47.9±12.9％vs。46.0±11.0％，P<0.01)均增加。此外，—449位攜帶C等位基因(GC+CC)增加高血壓左心室肥厚的易感度(OR=1.26，95％CI：1.03—1.53，P<0.01)。含有SNP—449C的DDAH2啟動(dòng)子區(qū)明顯降低轉(zhuǎn)錄活性(49.5％)。 結(jié)論: