芪參益氣滴丸對(duì)腎血管性高血壓大鼠左心室肥厚的影響.pdf

1、目的：探討芪參益氣滴丸(QS)對(duì)腎血管性高血壓大鼠左心室肥厚的影響及機(jī)制。
　　 方法：選擇50只體重200g 左右的雄性Wistar大鼠，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為5組(n=10),建立兩腎一夾腎血管性高血壓大鼠左室肥厚模型，包括:假手術(shù)組(SHAM)、手術(shù)組(2K1C)、QS小劑量干預(yù)組、QS大劑量干預(yù)組、纈沙坦干預(yù)組。術(shù)后4周末開(kāi)始灌胃，QS大、小劑量干預(yù)組分別給予芪參益氣滴丸250、125mg.kg-1．d-1，纈沙坦干預(yù)組給

2、予纈沙坦30mg.kg-1．d-1持續(xù)8周；假手術(shù)組和手術(shù)組給予相同劑量生理鹽水灌胃。
　　 治療8周后終止實(shí)驗(yàn)，測(cè)量大鼠尾動(dòng)脈收縮壓(SBP)、左心室重量指數(shù)(LVMI)、左心室壁厚度(LVWT)、HE 染色觀察心肌病理切片、VG 法檢測(cè)大鼠左室心肌膠原容積積分(CVF)、ELISA 法檢測(cè)抗氧化酶(SOD和GSH-PX)和活性氧自由基(ROS)以及用免疫組化法和western 印跡方法檢測(cè)大鼠左室心肌p-ERK1/2和CTG

3、F蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 (1) 術(shù)后4周，各手術(shù)組大鼠的平均收縮壓均大于150mmhg，手術(shù)組與假手術(shù)組相比血壓明顯升高(P＜0.01),各手術(shù)組大鼠血壓無(wú)明顯差異(P＞0.05)，高血壓大鼠模型成功建立。
　　 (2) 五組大鼠左室心肌病理形態(tài)HE 染色:術(shù)后12周，假手術(shù)組光鏡下可見(jiàn)，心肌纖維排列整齊，細(xì)胞大小及形態(tài)正常；手術(shù)組示，心肌纖維排列紊亂，心肌細(xì)胞橫徑增大；芪參大、小劑量組及纈沙坦組光鏡

4、下觀察與假手術(shù)組基本一致，心肌纖維排列較整齊，細(xì)胞橫徑差異不明顯。
　　 (3) 五組大鼠的LVMI、LVWT、CVF值比較：假手術(shù)組、手術(shù)組、芪參大劑量組、芪參小劑量組、纈沙坦組的LVMI(mg/g)分別是1.74±0.17、2.28±0.28、1.98±0.16、2.09±0.14、1.97±0.17；LVWT(mm)分別是2.24±0.22、3.07±0.22、2.76±0.21、2.89±0.17、2.69±0.14；C

5、VF(％)分別是0.45±0.13、4.73±1.04、0.94±0.22、2.53±0.61、0.81±0.20。手術(shù)組與假手術(shù)組比較，上述指標(biāo)明顯增大(P＜0.01)；芪參大、小劑量組之間的LVMI、LVWT及CVF值無(wú)顯著差異(P＞0.05)，與手術(shù)組相比，上述指標(biāo)明顯減小(P＜0.05)，而與纈沙坦組相比，上述指標(biāo)無(wú)顯著差異(P＞0.05)。
　　 (4) 五組大鼠左室心肌的抗氧化酶(SOD和GSH-PX)及氧自由基(R

6、OS)的比較：假手術(shù)組、手術(shù)組、芪參大劑量組、芪參小劑量組、纈沙坦組的SOD(u)分別是：105.12±7.20、97.58±6.26、111.63±5.97、103.41±5.19、113.56±6.22；GSH-PX(u)分別是：
　　 86.51±4.24、80.58±6.95、91.69±7.52、87.14±5.71、94.50±8.55；ROS(umol)分別是：10.20±1.38、12.31±2.31、9.81±

7、1.41、10.71±1.45、9.29±1.32。手術(shù)組與假手術(shù)組比較，SOD和GSH-PX 明顯降低、而ROS 明顯上調(diào)(P＜0.05)；芪參大、小劑量組之間的SOD、GSH-PX及ROS 無(wú)顯著差異(P＞0.05)，與手術(shù)組相比，SOD、GSH-PX明顯升高、而ROS 明顯降低(P＜0.05)，與纈沙坦組相比，上述指標(biāo)無(wú)顯著差異(P＞
　　 0.05)。
　　 (5) 五組大鼠左室心肌的P-ERK1/2和CTGF免

8、疫組化及半定量分析：P-ERK1/2和CTGF免疫組化染色均可見(jiàn)：假手術(shù)組，細(xì)胞胞漿中可見(jiàn)少量棕黃色細(xì)小顆粒狀表達(dá)物，散在分布，染色較弱；手術(shù)組心肌細(xì)胞胞漿中表達(dá)明顯增強(qiáng)，可見(jiàn)較多棕黃色顆粒狀物，彌漫分布；芪參大劑量組、芪參小劑量組、纈沙坦組心肌細(xì)胞胞漿中的表達(dá)較手術(shù)組明顯減輕，可見(jiàn)少量棕黃色細(xì)小顆粒，散在分布。P-ERK1/2蛋白半定量分析：假手術(shù)組、手術(shù)組、芪參大劑量組、芪參小劑量組、纈沙坦組分別是：0.1670±
　　 0

9、.0408、0.7367±0.1953、0.2378±0.0484、0.2810±0.0520、0.2350±0.0455；CTGF蛋白半定量分析：假手術(shù)組、手術(shù)組、芪參大劑量組、芪參小劑量組、纈沙坦組分別是：0.1700±0.0508、0.8167±0.2557、0.2444±0.0802、0.3100±0.0789、0.2410±0.0595。
　　 手術(shù)組與假手術(shù)組比較，P-ERK1/2和CTGF蛋白明顯升高(P＜0.01

10、)；芪參大、小劑量組之間的P-ERK1/2和CTGF蛋白無(wú)顯著差異(P＞0.05)，與手術(shù)組相比，P-ERK1/2和CTGF蛋白明顯下調(diào)(P＜0.05)；芪參大、小劑量組與纈沙坦組P-ERK1/2和CTGF蛋白無(wú)顯著差異(P＞0.05)。
　　 (6) 五組左室心肌P-ERK1/2和CTGF蛋白的Wes t er n 印跡分析：經(jīng)灰度分析后，假手術(shù)組、手術(shù)組和芪參益氣滴丸大、小劑量組、纈沙坦組P-ERK1/2蛋白的相對(duì)表達(dá)量分別

11、為65.91％、114.92％、78.45％、82.26％、64.05％，CTGF蛋白的相對(duì)表達(dá)量分別為26.87％、119.16％、72.50％、87.63％、52.59％。與手術(shù)組相比，假手術(shù)組、芪參益氣滴丸大、小劑量組、纈沙坦組的p-ERK1/2蛋白表達(dá)量均下降，分別為49.01％、36.47％、32.66％和50.86％；CTGF蛋白的表達(dá)量也均下降，分別為92.29％、46.66％、31.53％和66.57％。
　　

12、結(jié)論：
　　 (1) 本實(shí)驗(yàn)中，二腎一夾的大鼠腎血管性高血壓左心室肥厚模型是穩(wěn)定和成功的。
　　 (2) 腎血管性高血壓左心室肥厚的形成可能與心肌的抗氧化酶(SOD和GSH-PX)活性下降、氧自由基(ROS)水平上調(diào)及P-ERK1/2和CTGF蛋白的上調(diào)相關(guān)。
　　 (3) 芪參益氣滴丸能夠抑制腎血管性高血壓大鼠左室肥厚且作用與纈沙坦類(lèi)似。
　　 (4) 芪參益氣滴丸抑制腎性高血壓大鼠LVH的機(jī)制，可能與