大腸桿菌O157：H7 PCR檢測方法的建立及初步應(yīng)用.pdf

1、大腸桿菌0157：H7（Escherichia coli0157：H7）為一種危害嚴(yán)重的食源性致病菌，可使人感染患腹瀉、出血性結(jié)腸炎（hemorrhagic colitis，HC），還可在5～10％的病例中引發(fā)溶血性尿毒綜合癥（hemolytic uremic syndrome，HUS）及血栓性血小板減少紫癜（thrombotic thrombocytopenic purpura，TTP）等嚴(yán)重并發(fā)癥，嚴(yán)重者可導(dǎo)致死亡。EHEC0157

2、：H7的感染因具有暴發(fā)流行趨勢、強烈的致病性與致死性和抗生素治療可加劇病情的危險性等特點，已經(jīng)成為全球性的公共衛(wèi)生問題。我國已將腸出血性大腸桿菌列為21世紀(jì)可能對國人衛(wèi)生健康有重大影響的12種病原微生物之一。同時，0157：H7菌培養(yǎng)容易、繁殖迅速、感染力強、感染途徑廣泛，使之極有可能作為未來軍事斗爭中的細(xì)菌戰(zhàn)劑和生物恐怖戰(zhàn)劑。美國疾病預(yù)防控制中心（CDC）已將EHEC0157：H7菌列為B類生物恐怖病原體嚴(yán)加防范。近20年來給世界各國

3、帶來了巨大影響。 本文對其進行了微生物特點鑒定、定性和建立多重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）以及運用其技術(shù)進行檢測的研究。 首先對其進行微生物學(xué)培養(yǎng)和檢測，熟悉大腸桿菌0157：H7的基本生物學(xué)特性，并掌握用山梨醇麥康凱培養(yǎng)基（SMAC）初步鑒定0157：H7的方法。 其次，針對其特異性致病基因stx1，stx2和特異性鞭毛基因flic設(shè)計3對引物，建立多重PCR反應(yīng)體系，進行PCR檢測，結(jié)果表明3對引物皆可以有效擴增