利多卡因?qū)PS誘導(dǎo)的肺泡II型上皮細(xì)胞水通道蛋白5表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察不同劑量利多卡因預(yù)處理對LPS誘導(dǎo)大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞水通道蛋白5(Aquaporin-5，AQP-5)的影響，并對其可能機(jī)制進(jìn)行初步探討。
　　 方法：原代培養(yǎng)的大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞，隨機(jī)分7組(n=6)：1.空白對照組；2.溶劑對照組(無水乙醇，0.4μl/ml)；3.LPS組；4.Lidol(2μg/ml)+LPS組；5.Lido2(20μg/ml)+LPS組；6.Lido3(200μg/ml)+LPS組7.Li

2、do3組(單純Lido，終濃度為200μg/ml)，LPS終濃度為1μg/ml，相應(yīng)組加入LPS10min前加入Lido，4h后ELISA檢測上清液中TNF-α含量，RT-PCR及western blot檢測各組細(xì)胞AQP-5mRNA及蛋白表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：⑴ELISA結(jié)果顯示，空白對照組、溶劑對照組及Lido3組細(xì)胞上清液中TNF-α含量分別是(224.3±43.8)，(222.6±34.4)，(213.7±87.2)，

3、三組間無明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；與前面三組對照組比較，LPS組及Lido+LPS組TNF-α釋放增加(P<0.05)；與LPS組比較，Lido+LPS組TNF-α釋放減少(P<0.05)，Lido1+LPS組、Lido2+LPS組、Lido3+LPS組組間TNF-α釋放雖無明顯統(tǒng)計學(xué)差異，但數(shù)值上呈現(xiàn)明顯的劑量依賴性。⑵RT-PCR結(jié)果顯示，空白對照組、溶劑對照組及Lido3組均有AQP-5 mRNA表達(dá)，三者無明顯差異(P>0

4、.05)；前面三組對照組比較，LPS組及Lido+LPS組AQP-5 mRNA表達(dá)降低(P<0.05)；與LPS組比較，Lido+LPS組AQP-5 mRNA表達(dá)增加(P<0.05)，Lido1+LPS組、Lido2+LPS組、Lido3+LPS組組間AQP-5 mRNA表達(dá)雖無明顯統(tǒng)計學(xué)差異，但數(shù)值上呈現(xiàn)明顯的劑量依賴性。⑶Western blot結(jié)果顯示，空白對照組、溶劑對照組及Lido3組均有AQP-5蛋白表達(dá)，三者無明顯差異(P

5、>0.05)；前面三組對照組比較，LPS組及Lido+LPS組AQP-5蛋白表達(dá)降低(P<0.05)；與LPS組比較，Lido+LPS組AQP-5蛋白表達(dá)增加(P<0.05)，Lido1+LPS組、Lido2+LPS組、Lido3+LPS組組間AQP-5蛋白表達(dá)雖無明顯統(tǒng)計學(xué)差異，但數(shù)值上呈現(xiàn)明顯的劑量依賴性。
　　 結(jié)論：在LPS所致ALI細(xì)胞模型中，2-200μg/ml利多卡因預(yù)處理可上調(diào)肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞AQP-5 mRNA