P16基因的可控表達(dá)及其對(duì)膀胱胱癌細(xì)胞的體外生物學(xué)影響.pdf

1、在膀胱癌細(xì)胞中,純合缺失和甲基化是P16基因失活的主要形式.研究證明:恢復(fù)變異的P16基因功能或使用野生型P16基因替代變異的P16基因可以抑制膀胱癌細(xì)胞的生長(zhǎng).研究人員將構(gòu)建好的可誘導(dǎo)型人真核表達(dá)載體pMDNA3-16通過脂質(zhì)體介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)入人膀胱癌細(xì)胞系T24細(xì)胞中,用于替代因甲基化而喪失表達(dá)功能P16基因的作用.使用ZnSO<,4>作為誘導(dǎo)物,觀察P16基因的可控表達(dá)及其對(duì)膀胱癌細(xì)胞生長(zhǎng)能力的影響.采用細(xì)胞生長(zhǎng)曲線了解細(xì)胞生長(zhǎng)情況

2、,原位雜交方法檢測(cè)P16基因的mRNA的轉(zhuǎn)錄,免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)P16蛋白的表達(dá),流式細(xì)胞儀檢測(cè)P16蛋白對(duì)腫瘤細(xì)胞周期的影響.結(jié)論:P16基因與膀胱腫瘤的發(fā)生有關(guān),P16蛋白作用于細(xì)胞周期的G1/S關(guān)卡,對(duì)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)有抑制作用,通過人工構(gòu)建的真核表達(dá)載體pMDNA3-P16可以實(shí)現(xiàn)對(duì)P16基因表達(dá)的調(diào)控.確定誘導(dǎo)物的適宜范圍和作用時(shí)間,在此基礎(chǔ)上摸索出P16蛋白表達(dá)量-效應(yīng)關(guān)系曲線問題,均需要今后進(jìn)一步研究.研究人員的實(shí)驗(yàn)為上述