乙型肝炎病毒分子流行病學調查.pdf

1、乙型肝炎病毒分子流行病學調查乙型肝炎病毒(HBV)感染是全球范圍的重大公共衛(wèi)生問題。我國是乙型肝炎高發(fā)區(qū)。按照1992年全國乙型肝炎血清流行病學調查結果普通人群HBV感染陽性率為10％推算,我國現(xiàn)有慢性無癥狀的乙型肝炎病毒攜帶者超過1億,每年約30萬名患者死于肝硬化、肝癌等乙肝相關疾病。 HBV基因組變異是突變的隨機性和選擇的有序性作用的結果,機體免疫系統(tǒng)和藥物對HBV的選擇壓力與HBV基因進化及突變有關。根據(jù)HBV全基因序列異

2、質性≥8％可將其分為A～H8種基因型,每種基因型還可分為亞型和準種。研究表明,各基因型及亞型有一定的地理和人群分布特點,且與人類活動有關；各基因型的臨床轉歸、對抗病毒治療的應答、耐藥突變及其血清學轉換規(guī)律之間具有顯著差異。因此,研究HBV基因型及其基因進化規(guī)律對HBV感染的預防和控制具有十分重要的意義。研究表明,我國的HBV基因型A-D型均有分布,其中以C、B基因型為主,但相關研究均存在樣本量少,區(qū)域局限,沒有深入到基因亞型的研究等缺陷

3、。我國目前缺乏對于HBV基因型分布的系統(tǒng)研究,這在一定程度上也制約了HBV基因型研究的發(fā)展。 目的：通過乙肝分子流行病學調查確定本地區(qū)HBV基因型及亞型的地理分布,建立一種快速靈敏、高通量的鑒定HBV基因型及亞型的方法以適合大規(guī)模流行病學調查并分析HBV基因型及亞型在肝臟疾病中的作用。 方法：通過多重PCR反應對462例肝細胞癌患者(HCC組)、234例慢性乙肝患者(CH組)和110例HBV病毒攜帶者(ASC組)進行HB

4、V基因型及亞型的鑒定；并對其中采取手術切除或TACE或兩者聯(lián)合治療的228例基因亞型為B2和C2的HCC患者隨訪觀察1年。通過回顧性的分子流行病學研究共調查298例AHB患者、588例對照和572例患者家庭成員,填寫調查表,抽取5ml血液樣本。 結果： 1.建立了快速簡便的鑒定HBV基因型及亞型的型特異引物多重PCR方法。 2.探討HBV基因型及亞型在乙肝相關疾病中的分布規(guī)律以及在肝細胞癌(HCC)形成中的作用。

5、 檢測了中國東部地區(qū)(江蘇、浙江、安徽和上海)462例HBV DNA陽性的HCC患者、234例慢性乙肝患者(CH)和425例乙肝攜帶者(ASC)的HBV基因型、HBV DNA拷貝量和HBeAg;462例HCC患者中,B2型62例(13.4％),C2型337例(72.9％),混合型49例(10.6％)；在HCC組和CH組內,混合型的病毒滴度高于C2型,且這兩組內混合型所占的比例高于ASC組,HCC組的C2比例高于ASC組,HCC組

6、內B2型從<30歲年齡組到50-59歲年齡組有下降趨勢。通過多因素回歸分析發(fā)現(xiàn),年齡≥40歲、HBV DNA拷貝量≥10,000是HCC形成的獨立危險因素,年齡≤50歲、B2亞型的患者比C2亞型HCC患者更容易復發(fā)。 3.上海地區(qū)AHB感染新的危險因素以及AHB慢性化與基因型的關系。 通過回顧性的分子流行病學研究共調查298例AHB患者、588例對照和572例患者家庭成員,填寫調查表,抽取5ml血液樣本。多因素回歸分析表

7、明侵入性治療(AOR,3.72[95％C]2.55-5.42]),家庭內密切接觸(AOR,3.05[95％CI 2.11-4.41]),美容保健(AOR,1.52[95％ CI,1.09-2.12]),無乙肝疫苗接種史(AOR,7.78[95％ CI,3.76-16.11])是AHB感染的獨立危險因素。AHB患者中25例轉成慢性乙肝,占8.4％。C2型AHB患者慢性化比例大于82型,B2型患者與C2型相比有更高的病毒滴度和HBeAg表達

8、。 結論： 1.HBV基因型及亞型的多重PCR方法是一種快速、簡便、準確、高通量的方法,適合大規(guī)模的流行病學調查。 2.上海及周邊地區(qū)HBV基因亞型以C2型為主,B2型次之,HCC、CH及ASC人群中的基因型構成不同,通過HBV陽性的肝細胞患者、慢性乙肝患者和無癥狀攜帶者三組人群中HBV基因型及亞型的分布及臨床指標的差異確定上海及周邊地區(qū)HBV基因型及亞型在肝臟疾病譜中的分布,闡明了HBV混合基因型的感染發(fā)生HC