鞘內(nèi)長時間間斷注射羅哌卡因?qū)Υ笫蠹顾璩⒔Y(jié)構(gòu)及Bax和Bcl-2表達的影響.pdf

1、目的：觀察不同濃度羅哌卡因長時間間斷鞘內(nèi)注射對大鼠脊髓超微結(jié)構(gòu)以及Bax和Bcl-2表達的影響，探討線粒體凋亡途徑是否參與了羅哌卡因脊髓神經(jīng)毒性的細(xì)胞凋亡，為羅哌卡因在臨床蛛網(wǎng)膜下腔阻滯中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。 方法：體重280±16g的雄性SD大鼠72只，按改良Yaksh法成功置入microspinal導(dǎo)管。隨機分為生理鹽水組(N組，n=18)和羅哌卡因組(R組，n=54)，R組又分為三個不同濃度組，即分別經(jīng)microspina

2、l導(dǎo)管注入濃度為0.5％，0.75％，1％的羅哌卡因0.12ul/kg，分別記為R1組(n=18)，R2組(n=18),R3組(n=18)，每一濃度組又分為6h，12h,24h三個時間點組。每組間隔給藥時間均為1.5個小時。觀察注藥后的運動恢復(fù)時間和機械痛閾、熱痛閾改變。于注藥6h，12h和24h各組處死6只大鼠取脊髓腰膨大，隨機取出1mm3脊髓后角組織和神經(jīng)根后固定行透射電鏡觀察脊髓、神經(jīng)根早期超微結(jié)構(gòu)變化，剩余脊髓及神經(jīng)根進行免疫組

3、化分析。 結(jié)果： 1.R3組的各時間點組大鼠雙下肢肌張力恢復(fù)均較R1，R2組減慢，各組各時間點之間比較無差異。 2.HE染色光鏡下R3組的12h,24h組可看到后角白質(zhì)出現(xiàn)空泡現(xiàn)象，細(xì)胞間質(zhì)水腫，神經(jīng)細(xì)胞核固縮，核周間隙增寬。N組電鏡結(jié)果示正常，R1，R2組超微結(jié)構(gòu)的主要改變?yōu)榫€粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕度水腫，R1的24h組，R2的12h和24h組部分有髓纖維板層結(jié)構(gòu)疏松，可見軸索腫脹，局灶變性，R3組的改變則明顯嚴(yán)重，各

4、時間點均可見神經(jīng)元細(xì)胞核膜皺縮，呈花邊樣改變，大多數(shù)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹嚴(yán)重，線粒體空泡樣變，還可見局灶性脫髓鞘改變，軸索變性或消失，細(xì)胞間質(zhì)水腫明顯，且以24h組為甚。 3.N組Bax和Bcl-2均有少量表達，染色淡，R1和R2組的Bax表達在6小時開始增加，12小時后增高明顯，到24小時一直呈上升趨勢，但同期Bcl-2也在增高，Bcl-2/Bax比值與生理鹽水組比較無顯著性差異。R3組的Bax表達在各時間點高于其它三組，Bcl-2

5、表達低于R1，R2組，Bcl-2/Bax比值亦低于其它三組。 結(jié)論： 1.0.5％，0.75％的羅哌卡因24小時鞘內(nèi)間斷注射下大鼠產(chǎn)生了線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕度腫脹的脊髓超微結(jié)構(gòu)改變，并呈劑量和濃度依賴性。而1％的羅哌卡因鞘內(nèi)間斷注射6小時可產(chǎn)生脊髓毒性改變。 2.1％羅哌卡因長時間鞘內(nèi)間斷注射下脊髓Bax表達在6小時開始增加，到24小時一直呈升高趨勢，脊髓毒性改變與Bcl-2/Bax比值相關(guān)，提示羅哌卡因脊髓毒性可能