中華眼鏡蛇神經(jīng)毒素抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥效學(xué)研究.pdf

1、目的：確定中華眼鏡蛇神經(jīng)毒素（Cobrotoxin，CTX）在不同炎癥模型中的抗炎作用，進而研究CTX對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的抑制作用及其可能的機制。
　　方法：利用小鼠足底注射甲醛致炎實驗、小鼠腹腔炎性滲出實驗以及大鼠紙片肉芽腫實驗確定CTX的抗炎作用；利用佐劑型關(guān)節(jié)炎（Adjuvant-induced arthritis，AA）大鼠模型研究CTX的抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎作用：用關(guān)節(jié)炎評分、足腫脹、關(guān)節(jié)病理作為抗關(guān)節(jié)炎的藥效學(xué)指征，同時用C

2、CK-8法檢測T淋巴細(xì)胞體外增殖能力，用流式細(xì)胞儀檢測大鼠外周血中的CD4和CD8不同T細(xì)胞亞群水平的改變，用ELISA試劑盒檢測血清IL-6、TNF-α、IL-1β水平，血液學(xué)分析儀檢測外周血中的炎性細(xì)胞數(shù)。此外，我們通過原代培養(yǎng) AA大鼠成纖維樣滑膜細(xì)胞（fibroblast-like synoviocytes，F(xiàn)LSs），檢測了細(xì)胞給藥后FLSs的增殖能力以及NF-κB的核轉(zhuǎn)位情況。
　　結(jié)果：在3種炎性模型中，CTX一定程

3、度上抑制了足底注射甲醛引起的小鼠足腫脹、腹腔注射醋酸引起的毛細(xì)血管通透性改變這兩種經(jīng)典的急性炎癥反應(yīng)，并較為明顯地抑制了大鼠肉芽腫的生成這一慢性炎癥反應(yīng)。在 AA大鼠模型中，CTX給藥后大鼠關(guān)節(jié)炎評分、足腫脹程度較模型組降低，關(guān)節(jié)病理情況好轉(zhuǎn)；CTX抑制了由于造模引起的T淋巴細(xì)胞的大量增殖以及異常升高的CD4/CD8水平，具有抑制異常增高的免疫反應(yīng)的作用；此外，CTX抑制了AA大鼠血清中炎癥因子IL-6、TNF-α、IL-1β的水平、炎