1,2,3,4,6五[-O-(3,4,5-三羥基苯甲酰)]-a,β-D-葡萄糖類似物抑制腫瘤細胞生長作用的研究.pdf

1、腫瘤已經成為當今世界人類健康的一大難題，患腫瘤疾病的人數(shù)每年都在持續(xù)上漲，死亡率也在逐年上升。因此，抗腫瘤的研究越來越多的受到人們的關注。在這其中，找到合適的抗腫瘤藥物的候選化合物是治療腫瘤疾病的有效手段之一。鞣酸是植物中大量存在的一種多酚類鞣質，在以往的研究中發(fā)現(xiàn)，鞣酸具有抗氧化、抗菌和抗腫瘤等多種活性。1，2，3，4，6五[-O-（3，4，5-三羥基苯甲酰）]-α，β-D-葡萄糖(PGG)是一種重要的鞣質，是鞣酸生物合成途徑中的重要

2、中間物。近年來的研究也發(fā)現(xiàn)PGG具有抗腫瘤活性，因此我們以PGG及其類似物作為研究對象，對其進行抗腫瘤作用的研究。
　　我們共合成了包括PGG在內的33種鞣質類化合物，并按照化合物的結構特征將這些化合物分成9組依次在人結腸癌細胞（HCT116和HT29）、人肺癌細胞（A549和H1299）上進行了活性的初步篩選。按照篩選結果，從中選擇了兩組活性強、結構特征明顯的化合物，以阿霉素作為陽性對照藥，對這兩組化合物在這四種腫瘤細胞上的半數(shù)

3、抑制率進行了計算。從以上結果中我們可以得出，在PGG苯環(huán)上的取代對化合物的抗腫瘤活性有一定的影響，這其中的原因可能是因為在苯環(huán)上的羥基取代形成了高穩(wěn)定性的分子內氫鍵。由此可知，PGG類化合物羥基的個數(shù)以及它們在苯環(huán)上的取代位置對腫瘤細胞的細胞毒活性有著至關重要的作用。根據IC50的結果，我們發(fā)現(xiàn)化合物PVG有著與PGG類似的抗腫瘤活性，且在人結腸癌細胞HT29和人肺癌細胞H1299上的細胞毒活性強于陽性對照藥阿霉素。因此，我們選擇PVG

4、作為這些化合物中的代表進行了進一步的抗腫瘤活性研究。
　　首先，我們對PVG在不同濃度和不同時間下對人結腸癌細胞HCT116和人肺癌細胞A549的抑制生長作用進行了研究。結果發(fā)現(xiàn)，PVG對人結腸癌細胞HCT116和人肺癌細胞A549有抑制作用，且有濃度依賴性和時間依賴性。按照實驗結果，我們選擇了藥物作用時間為48小時作為下面實驗的指標。同時，我們探討了由PVG誘導的腫瘤細胞的生長抑制作用是否與氧自由基(ROS)介導的腫瘤細胞凋亡作

5、用有關。因此，我們選擇了不同濃度的NAC單獨作用于腫瘤細胞、NAC與相同濃度的PVG共同作用于腫瘤細胞和PVG單獨作用于腫瘤細胞，得出的結果是化合物PVG對人結腸癌細胞HCT116和人肺癌細胞A549的生長抑制作用并不是通過氧自由基(ROS)途徑所進行的。為了進一步研究PVG的抗腫瘤生長作用機制，我們通過使用流式細胞儀進行了PVG對人結腸癌細胞HCT116和人肺癌細胞A549細胞周期的研究，從結果可以看出，PVG對人結腸癌細胞HCT11

6、6和人肺癌細胞A549具有明顯的周期阻滯作用，隨著PVG濃度的升高，阻滯在G2/M期的細胞數(shù)隨之升高，說明這兩種腫瘤細胞的細胞周期均被PVG阻滯在G2/M期。另外，我們通過Western blotting檢測了PVG在人結腸癌細胞HCT116和人肺癌細胞A549上對凋亡相關蛋白PARP、Hsp90表達含量的影響，結果顯示PVG在HCT116和A549上作用48個小時后，能顯著增加PARP有活性的剪切片段的表達，以及降低熱休克蛋白Hsp9