4-胺基-1,8-萘酰亞胺結(jié)構(gòu)類似物作為PARP抑制劑的研究.pdf

1、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（poly(ADP-ribose) polymerase，PARP）在DNA損傷及修復活動扮演著關(guān)鍵的角色，廣泛參與DNA損傷的識別和信號轉(zhuǎn)導過程，為癌癥治療提供了新靶點，推動著抗癌藥物的研發(fā)。目前，已研發(fā)出許多選擇性和敏感性均較好的PARP抑制劑，且大部分已進入臨床試驗階段。4-胺基-1，8-萘酰亞胺（4-AN）作為PARP抑制劑已有報道，用作化療和放療的增敏劑，但其類似物并沒有作為PARP抑制劑的研究，我們判斷

2、4-AN結(jié)構(gòu)類似物中也具有抑制PARP的化合物。
　　研究目的:
　　本課題我們借鑒4-AN核心結(jié)構(gòu)，設(shè)計、合成出一系列具有三環(huán)結(jié)構(gòu)的1H-苯并[de]異喹啉-1,3（2H）-二酮的類似物，并對其進行結(jié)構(gòu)鑒定，同時評價了它們的PARP抑制活性和生物活性，篩選出具有PARP抑制性活的化合物，作為新型PARP抑制劑。
　　研究方法:
　　（1）4-胺基-1，8-萘酰亞胺類似物的設(shè)計。通過分析4-AN結(jié)構(gòu)和參考PARP

3、藥效團，設(shè)計出一系列4-AN類似物，該合成方法簡單易行，產(chǎn)率較高。
　?。?）4-AN類似物的合成及結(jié)構(gòu)鑒定。所有化合物通過核磁、高分辨和液質(zhì)進行鑒定。
　?。?）PARP抑制活性的檢測。通過非放射性的、高度敏感的比色酶標方法，評價了所有化合物對PARP-1酶的抑制活性。選擇出PARP-1抑制率>50％的化合物（10μM）測定其IC50值。
　?。?）分子對接模型建立。通過計算機模擬出化合物與PARP-1酶的分子對接情

4、況。
　?。?）化合物生物活性評價。將篩選出具有PARP抑制活性的化合物，配制成不同濃度梯度，通過 MTT實驗，得到使腫瘤細胞存活率大于80%的最高濃度。然后與不同濃度的順鉑聯(lián)合作用于腫瘤細胞，MTT獲取的數(shù)據(jù)計算出聯(lián)合指數(shù)，進而評價藥物聯(lián)合使用的效力。
　　研究成果:
　?。?）設(shè)計合成出一系1H-苯并[de]異喹啉-1，3（2氫）-二酮類似物。
　　（2）通過體外PARP活性初步篩選，化合物3c，3d，3e

5、IC50值分別為2.39，0.51，6.08?M，化合物3d的PARP-1抑制效果最好，水溶性優(yōu)于4-AN。
　?。?）分子對接模擬表明3d中的羥基通過靜電作用與Glu988的殘基形成氫鍵，3c的具有兩個氫鍵與Glu988結(jié)合。對未來的結(jié)構(gòu)優(yōu)化起到參考作用。
　?。?）聯(lián)合用藥實驗的細胞毒性顯示3d與順鉑具有協(xié)同效果，能夠減少順鉑的使用量。
　　研究結(jié)論:
　　化合物3d具有PARP抑制活性，其IC50值為0.5