不同倍性鯽鯉相關分子生物學特征研究.pdf

1、分類號學校代碼1 0 5 4 2密級學號—墊0 9 2 1 4 1 1 0 1 8不同倍性鯽鯉相關分子生物學特征研究S t u d y o n R e l a t e d M o l e c u l a r B i o l o g yo fD i f f e r e n t P l o i d yC y p r i n i d s研究 生姓名指導教師姓名、職稱學 科 專 業(yè)研 究 方 向湖南師范大學學位評定委員會辦公室二零一二年六月摘

2、要通過紅鯽( 旱) ( C a r a s s i u s a u r a t u s r e d v f l r ．) 和鯉魚( 杏) ( C y p r i n u sc a r p i oL ．) 屬問遠緣雜交，在其后代成功培育出了異源四倍體鯽鯉群體，目前已繁殖了1 9 代( F 。一F 2 ，) 。該群體兩性可育，遺傳性狀穩(wěn)定，為探討魚類多倍體的形成提供了重要研究模型，為多倍體進化的相關遺傳和表觀遺傳研究提供了良好的實驗材料。以

3、雄性異源四倍體鯽鯉與雌性二倍體日本白鯽( C a r a s s i u sc u v i e r i ) 的倍性雜交形成了不育的三倍體湘云鯽。該三倍體、四倍體魚的形成為開展不同倍性魚的生物學比較研究提供了重要的生物學平臺。不改變D N A 序列而能影響生物體基因表達與表現(xiàn)型的表觀遺傳效應，對雜交多倍體生物的形成與進化適應具有重要的調(diào)控作用。D N A 甲基化是表觀遺傳調(diào)控的最主要方式，進行異源四倍體鯽鯉及其親本，紅鯽和鯉魚的D N A

4、 甲基化研究，探討異源四倍體魚與親本相比所發(fā)生的D N A 甲基化模式的變化，甲基化水平增加或降低的程度，甲基化對相關序列的修飾等內(nèi)容，有助于了解雜交四倍體魚形成所經(jīng)歷的表觀遺傳效應。另外，在已有的有關不同倍性魚育性研究的基礎上，本文開展了促性腺激素F S H 和L H 的兩類旁分泌調(diào)節(jié)物質(zhì)，活化素A c t i v i n及卵泡抑素F o l l i s t a t i n 基因的分子克隆及序列分析，為進一步從遺傳學角度探討三倍體湘云

5、鯽不育和四倍體鯽鯉可育的機制奠定了基礎。本論文的研究結果如下：1 ．利用甲基化敏感擴增多態(tài)性( M S A P ) 方法分析了紅鯽、鯉魚和異源四倍體鯽鯉的D N A 胞嘧啶甲基化模式。根據(jù)條帶的位置和有無情況，顯示在變性聚丙烯酰胺凝膠上的甲基化條帶呈4 種不同模式：非甲基化( C C G G ) 模式；內(nèi)胞嘧啶全甲基化( C m C G G ) 模式；外胞嘧啶半甲基化( m C C G G ) 模式；還有一種模式在M s p I 和H