子宮NK細胞在ASD中作用機制.pdf

1、人體的免疫系統(tǒng)是一個相互制衡的穩(wěn)態(tài)環(huán)境。作為孕育新生命的子宮，承擔著作為一個物種繁衍后代的歷史使命。近些年來，子宮免疫環(huán)境的研究越來越受重視。而子宮對于胚胎的耐受機制也一直是人們的研究熱點。在子宮當中，除了子宮內(nèi)膜細胞，胎兒的滋養(yǎng)層細胞外，還有一群在母胎界面無處不在的免疫細胞，包括巨噬細胞、DC細胞、T淋巴細胞、NK細胞等。
　　這其中作為自然殺傷細胞的NK細胞自然不容忽視。在以往的研究中，發(fā)現(xiàn)NK細胞除了行使其殺傷功能外。處于子

2、宮當中的NK細胞，還行使著維持母胎界面免疫耐受的功能。
　　ASD又被稱為自閉癥譜系障礙，是一種嚴重普遍的神經(jīng)發(fā)育障礙。根據(jù)美國最新的精神病協(xié)會(DSM-V)，將ASD臨床表現(xiàn)描述為按社交障礙和重復刻板行為。而我們?nèi)粘Ｋ盍私獾淖蚤]癥(autistic disorder)則是其中最嚴重的一種疾病形式。ASD患者多為兒童時期即發(fā)病，并且在日后的生活中并不能得到非常有效的治療，使這一類人在社會互動，言語或非言語交際上受到嚴重的限制。并

3、且長此以往，也給家庭帶來了沉重的負擔。正因為如此，全世界對于ASD的研究層出不窮。
　　在本研究中，我們試圖從母胎界面的子宮NK細胞入手，來揭開ASD疾病的一層薄紗。首先，我們通過向C57BL/6J小鼠腹腔注射TLR3激動劑poly(I∶C)，觀察到小鼠容易出現(xiàn)流產(chǎn)的狀況，并且胎鼠的生長發(fā)育嚴重受限。胎鼠的大腦皮層結(jié)構混亂無序，出現(xiàn)ASD疾病中大腦皮層會出現(xiàn)的現(xiàn)象。接著，我們對小鼠的子宮免疫細胞進行了檢測。發(fā)現(xiàn)經(jīng)過poly (I∶

4、C)處理的小鼠子宮當中，子宮NK細胞的比例發(fā)生明顯降低。CD49a+ Eomes+的子宮NK細胞被認為是子宮所獨有的組織居留細胞。E12.5天，用poly(I∶C)處理孕鼠之后，CD49a+ Eomes+的子宮NK細胞的比例也發(fā)生明顯下降。E13.5天，我們檢測到子宮中的CD4+T細胞分泌IL-17A的水平明顯提高，即子宮Th17細胞比例增多。而子宮NK細胞，其分泌IFN-γ的能力下降，分泌顆粒酶B的能力增強。
　　研究表明子宮N

5、K細胞可以通過IFN-γ來負調(diào)子宮Th17細胞分泌IL-17A的能力。并且ASD發(fā)病的重要原因就是母胎界面IL-17A大量增多，通過母胎血腦屏障與胎兒大腦內(nèi)的IL-17A受體相結(jié)合，最終導致大腦皮層結(jié)構的錯亂。因此我們猜測子宮NK細胞可能可以通過分泌IFN-γ來阻止ASD的發(fā)生。
　　我們選擇了IFN-γ分泌缺陷的T-bet缺陷鼠和缺乏NK細胞的Nfil3缺陷鼠，進行進一步的檢測。發(fā)現(xiàn)相比較WT鼠而言，T-bet缺陷鼠更容易發(fā)生I

6、L-17A的高水平分泌。而Nfil3缺陷鼠則在子宮居留NK細胞比例上低于WT鼠，并且大腦發(fā)育結(jié)構錯亂。由此，驗證了子宮NK細胞對于大腦發(fā)育和維持母胎免疫環(huán)境穩(wěn)定的重要性。子宮NK細胞可以通過IFN-γ的水平來加重或者延緩ASD發(fā)生的可能。
　　進一步，我們選擇了人體正常妊娠的子宮細胞，并且將子宮淋巴細胞與滋養(yǎng)層細胞在體外共同培養(yǎng)，并且用poly (I∶C)刺激。人體子宮NK細胞的比例并沒有發(fā)生改變，但是其分泌IFN-γ的能力發(fā)生了