肝內(nèi)腫塊型膽管細(xì)胞癌在影像學(xué)和分子生物學(xué)以及子宮內(nèi)膜癌在分子生物學(xué)特征的研究.pdf

1、本文主要從以下幾方面進(jìn)行論述：
　　第一部分 肝內(nèi)腫塊型膽管細(xì)胞癌在肝膽特異性對(duì)比劑Gd-BOPTA增強(qiáng)磁共振表現(xiàn)特點(diǎn)的研究
　　目的:研究肝內(nèi)腫塊型膽管細(xì)胞癌(intrahepatic mass-forming cholangiogcarcinoma，IMC)在3.0T磁共振的表現(xiàn)特點(diǎn)，評(píng)價(jià)肝內(nèi)腫塊型膽管細(xì)胞癌的強(qiáng)化方式和強(qiáng)化特征，尤其是重點(diǎn)評(píng)價(jià)病變?cè)贕d-BOPTA增強(qiáng)磁共振上肝膽特異期的特征。
　　方法:回顧性的

2、分析了2011年3月到2015年7月的66位患者的66例經(jīng)病理證實(shí)的肝內(nèi)腫塊型膽管細(xì)胞癌，所有患者均在3.0T磁共振(Magnetom Verio，Siemens，Germany)應(yīng)用肝膽特異性對(duì)比劑釓貝酸二葡甲胺(gadobenate dimeglumine，Gd-BOPTA)作為對(duì)比劑行進(jìn)行增強(qiáng)掃描檢查，主要觀察了以下磁共振圖像的特點(diǎn):T1WI，T2WI，DWI，T1WI動(dòng)態(tài)增強(qiáng)掃描序列（動(dòng)脈期、門脈期、延遲期）以及T1WI肝膽特異

3、期序列。定量、定性的評(píng)估了每一個(gè)膽管細(xì)胞癌的信號(hào)強(qiáng)度、強(qiáng)化方式、強(qiáng)化程度和腫瘤邊界。還分析了DWI序列的圖像并計(jì)算了每一個(gè)腫瘤的ADC值。以上這些研究使用了Wilcoxon符號(hào)秩檢驗(yàn)以及獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。
　　結(jié)果:研究了66位患者的66例肝內(nèi)腫塊型膽管細(xì)胞癌。在動(dòng)態(tài)增強(qiáng)掃描圖像中，57個(gè)病灶(86.4％)表現(xiàn)為動(dòng)脈期病灶的周邊明顯強(qiáng)化、在門脈期及延遲期病灶中央漸進(jìn)性強(qiáng)化而病灶周邊強(qiáng)化程度下降。在延遲期，所有病灶均顯示為腫痛周邊環(huán)狀

4、低信號(hào)、腫瘤中央不均勻的高或低信號(hào)。在肝膽特異期，61個(gè)病灶(92.4％)顯示為周圍環(huán)狀的低信號(hào)、中間為高信號(hào)。此外，有57個(gè)病灶(86.4％)在DWI序列表現(xiàn)為周圍高信號(hào)、中間不均勻低或混雜信號(hào)。在肝膽特異期，膽管細(xì)胞癌有著最高的醒目性評(píng)分（中位數(shù)，5;四分位距，4-5）。在肝膽特異期，中分化膽管細(xì)胞癌的強(qiáng)化程度(48.2％±15.6％)要高于低分化膽管細(xì)胞癌的強(qiáng)化程度(35.5％±18.9％)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的膽管細(xì)胞癌的強(qiáng)化程度(4

5、7.6％±18.8％)要高于沒有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的膽管細(xì)胞癌的強(qiáng)化程度(33.7％±19.6％)。此外，低分化的膽管細(xì)胞癌的ADC值(0.75×10-3mm2/s±0.18×10-3mm2/s)要低于中分化的膽管細(xì)胞癌的ADC值0.98×10-3mm2/s±0.22×10-3mm2/s)。
　　結(jié)論:在Gd-BOPTA增強(qiáng)的磁共振圖像上，肝內(nèi)腫塊型膽管細(xì)胞癌最常見的強(qiáng)化方式是動(dòng)脈期腫瘤周邊明顯環(huán)狀強(qiáng)化、門脈期和延遲期腫瘤中央漸進(jìn)樣強(qiáng)化而

6、腫瘤周邊強(qiáng)化程度下降。在肝膽特異期，肝內(nèi)腫塊型膽管細(xì)胞癌的典型特點(diǎn)是腫瘤周邊低信號(hào)、腫瘤中央高信號(hào)，這種表現(xiàn)與肝內(nèi)腫塊型膽管細(xì)胞癌在應(yīng)用Gd-EOB-DTPA時(shí)增強(qiáng)掃描后在肝膽特異期的表現(xiàn)特點(diǎn)是不同的。肝內(nèi)腫塊型膽管細(xì)胞痛這種周邊低信號(hào)、中央高信號(hào)或是周邊高信號(hào)、中央低信號(hào)的這種“靶征”表現(xiàn)可出現(xiàn)于肝內(nèi)腫塊型膽管細(xì)胞癌的延遲期、肝膽特異期以及彌散加權(quán)圖像上。此外，肝內(nèi)腫塊型膽管細(xì)胞癌在肝膽特異期更為醒目，其輪廓和邊緣顯示的更為清晰。低分

7、化膽管細(xì)胞癌的ADC值要低于中分化膽管細(xì)胞癌的ADC值，這可以為臨床的治療和預(yù)后提供更多有益的信息。
　　第二部分 應(yīng)用3.0T磁共振分析肝內(nèi)腫塊型膽管細(xì)胞癌表觀擴(kuò)散系數(shù)與分子標(biāo)記物Ki-67之間的關(guān)系
　　目的:肝內(nèi)腫塊型膽管細(xì)胞癌（intrahepatic mass-forming cholangiogcarcinoma，IMC)是肝內(nèi)第二常見的原發(fā)性惡性腫瘤。Ki-67蛋白是一種與核糖體RNA轉(zhuǎn)錄有關(guān)的核蛋白，在細(xì)胞增

8、殖的各期（G1，S，G2和M）均有表達(dá)，Ki-67染色指數(shù)(Ki-67 staining index，Ki-67 SI)可用于判定細(xì)胞增殖的活性程度。著重研究了經(jīng)3.0T磁共振檢查的肝內(nèi)腫塊型膽管細(xì)胞癌的表觀擴(kuò)散系數(shù)（Apparent diffusion coefficient，ADC）與分子標(biāo)記物Ki-67 SI表達(dá)之間的關(guān)系。
　　方法:選取了38位患者的38個(gè)經(jīng)病理證實(shí)的肝內(nèi)腫塊型膽管細(xì)胞癌（其中包括16例中分化膽管細(xì)胞癌和

9、22例低分化膽管細(xì)胞癌），患者包括28位男性和10位女性，平均年齡61.3歲。所有患者均行3.0T磁共振檢查(Magnetom Verio 3T, Siemens，Germany)。各掃描序列為:橫斷位脂肪抑制T2WI，其脂肪抑制技術(shù)采用FS (fat saturation);橫斷位雙回波T1WI正相位和反相位;彌散加權(quán)成像(diffusion-weighted imaging，DWI); T1WI平掃及增強(qiáng)采用三維容積內(nèi)插體部檢查序列

10、(volume interpolated body examination，VIBE);注射釓塞酸二鈉(Gd-BOPTA，MultiHance,0.1 mmol/kg)后，增強(qiáng)掃描各期時(shí)間分別為動(dòng)脈期(25-30s)，門脈期(60-70s)，延遲期(10min)，肝膽特異期(90-100 min)。DWI序列選擇的b值為0和800 sec/mm2，ADC值通過(guò)工作站系統(tǒng)(Syngo Multimodality workplace，Sie

11、mens，Germany)重建而成。ADC值的計(jì)算公式為:ADC=-ln(s(b=800)/s(b=0))/800，其中S(b=800)、S(b=0)分別為b=800sec/mm2和b=0 sec/mm2時(shí)相對(duì)應(yīng)的DWI圖像的信號(hào)。使用感興趣區(qū)(regions of interest，ROI)測(cè)量病灶在ADC圖上的ADC值。病灶內(nèi)感興趣區(qū)的范圍要盡可能的大(感興趣區(qū)范圍:100.1 mm2-4577.9 mm2)。感興趣區(qū)要避開大血管、

12、出血區(qū)域、壞死區(qū)域及偽影區(qū)域。計(jì)算出所有病灶的平均ADC值，其計(jì)算公式為mean ADC=(n∑(i)=1ADC(i)S(i))/n∑(i)=1S(i)其中n表示一個(gè)病灶所含有的ROI的個(gè)數(shù)，Si為第i個(gè)感興趣區(qū)面積的大小，ADCi為第i個(gè)ROI的ADC的平均值。
　　結(jié)果:一共研究了16個(gè)中分化膽管細(xì)胞癌和22個(gè)低分化膽管細(xì)胞癌。其中，將16例中分化膽管細(xì)胞癌分為2組:一組為7例高Ki-67染色的膽管細(xì)胞癌，另一組為9例低Ki-

13、67染色的膽管細(xì)胞癌。肝內(nèi)腫塊型膽管細(xì)胞癌的ADC值與Ki-67染色指數(shù)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.699，p=0.000)。16例中分化膽管細(xì)胞癌的ADC值與Ki-67染色指數(shù)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.633，P=0.025); 22例低分化膽管細(xì)胞癌的ADC值與Ki-67染色指數(shù)也呈負(fù)相關(guān)(r=-0.589，P=0.037)。低分化膽管細(xì)胞癌的平均ADC值(0.79×10-3 mm2/s±0.12×10-3mm2/s)要明顯低于中分化膽管細(xì)胞癌的

14、平均ADC值(0.95×10-3 mm2/s±0.29×10-3 mm2/s)。
　　結(jié)論:研究表明肝內(nèi)腫塊型膽管細(xì)胞癌的ADC值與腫瘤的Ki-67染色指數(shù)之間存在著明顯的負(fù)相關(guān)，ADC值可以反映腫瘤細(xì)胞的增殖活性，可應(yīng)用DWI及ADC來(lái)預(yù)測(cè)肝內(nèi)腫塊型膽管細(xì)胞癌的分化程度。
　　第三部分 長(zhǎng)鏈非編碼RNA在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及作用機(jī)制的研究
　　目的:應(yīng)用芯片技術(shù)研究長(zhǎng)鏈非編碼RNA (long non-coding

15、RNA，lncRNA)在子宮內(nèi)膜癌及其鄰近正常子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)。
　　方法:在這次研究中，使用了45例經(jīng)病理證實(shí)的子宮內(nèi)膜癌標(biāo)本以及其鄰近的正常子宮內(nèi)膜組織標(biāo)本，所有的標(biāo)本在手術(shù)切除后迅速冷凍在液氮里，然后接著保存在-80℃的冰箱里。應(yīng)用第三代lncRNA芯片分析技術(shù)(Arraystar 公司的人類LncRNA芯片分析V3.0)來(lái)檢測(cè)子宮內(nèi)膜癌及鄰近正常子宮內(nèi)膜組織中的lncRNA和mRNA。為了進(jìn)一步了解lncRNA的生化功

16、能，還進(jìn)行了生物信息學(xué)分析（生物學(xué)通路分析和基因本體分析）。
　　結(jié)果:在子宮內(nèi)膜癌標(biāo)本中共監(jiān)測(cè)到30586個(gè)lncRNA和26109個(gè)mRNA（倍數(shù)＞2倍），與正常子宮組織相比，有4010個(gè)lncRNA的表達(dá)是上調(diào)的，有3350個(gè)lncRNA的表達(dá)是下降的在qRT-PCR分析中，有7個(gè)lncRNA與芯片分析的結(jié)果一致，包括3個(gè)表達(dá)升高的lncRNA(uc003xut，uc021 re 1.1，ENST00000445734)和4

17、個(gè)表達(dá)下降的lncRNA (uc002nbr.3，ENST00000502941，ENST00000448093，ENST00000503710)，其中uc003xut和ENST00000502941分別是表達(dá)升高的lncRNA和表達(dá)下降的lncRNA中表達(dá)最為顯著的。此外，生物學(xué)通路分析表明有24條通路與表達(dá)升高的mRNA有關(guān)，其中“Neuroactive ligand-receptor interaction-Homo sapien