原發(fā)性高血壓病人血清miRNAs差異表達譜研究.pdf

1、目的：通過 miRNA芯片技術獲得原發(fā)性高血壓病人和健康人血清中差異表達的miRNAs譜，通過qRT-PCR技術驗證芯片結果的可靠性，生物信息學分析關鍵miRNAs調控的靶基因及所涉及的信號通路，闡明miRNA在高血壓發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　方法：收集20例高血壓病人和10例健康人的血清標本，Trizol試劑提取總RNA；采用miRNA基因芯片技術檢測高血壓病人和健康人血清中差異表達的miRNAs；運用qRT-PCR技術驗證芯片篩

2、選出的差異表達的兩個miRNAs：miR-132和miR-155；通過生物信息學分方法分析miR-132和miR-155所調控的靶基因及涉及到的信號通路，分析miR-132和miR-155是如何調控信號通路影響高血壓的發(fā)生發(fā)展。
　　結果：
　　1.獲得高血壓病人血清的差異 miRNAs表達譜。高血壓病人中，上調的miRNAs有33個；而下調的miRNAs有12個。
　　2.高血壓病人中，基因芯片檢測發(fā)現(xiàn)，上調倍數(shù)最大

3、的為miR-132，上調29.3389倍；下調倍數(shù)最大的為miR-155，下調-15.2452倍。
　　3.20例高血壓病人中，miR-132的相對平均值為102.8±9.3，10例健康人中， miR-132的相對平均值為5.2±0.5，上調倍數(shù)為24.2313倍。20例高血壓病人中，miR-155的相對平均值為1.6±0.2，10例健康人中，miR-155的相對平均值為19.1±1.3，下調倍數(shù)為-12.2337倍，這兩個miR

4、NA分子在基因芯片中的表達趨勢和qRT-PCR驗證結果一致。
　　4. miR-132調控的靶基因有261個，miR-155調控的靶基因有440個。261個miR-132調控的靶基因涉及的信號通路主要包括：VEGF、MAPK、p53、TGF-β、Wnt等信號通路；440個miR-155調控的靶基因涉及的信號通路主要包括：MAPK、Jak-STAT、mTOR、ErbB、TGF-β、細胞骨架等信號通路。
　　結論：
　　1

5、.獲得了高血壓病人與健康人血清的 miRNAs差異表達譜，在高血壓血清中，上調的miRNAs有33個，下調的miRNAs有12個。
　　2.基因芯片檢測發(fā)現(xiàn)，高血壓病人中，上調倍數(shù)最大的為miR-132；下調倍數(shù)最大的為 miR-155。血清學樣本檢測發(fā)現(xiàn)，miR-132和miR-155表達水平與基因芯片結果一致。說明基因芯片結果可靠。
　　3.生物信息學分析結果表明，miR-132和miR-155調控的靶基因涉及到信號通路