牛傳染性支氣管炎抗體ib-ab酶聯(lián)免疫分析elisa

1、1牛傳染性支氣管炎抗體牛傳染性支氣管炎抗體(IBAb)(IBAb)酶聯(lián)免疫分析酶聯(lián)免疫分析(ELISA)(ELISA)試劑盒使用說明書試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定牛血清，血漿及相關(guān)液體樣本中傳染性支氣管炎抗體(IBAb)的含量。實驗原理：實驗原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標本中牛傳染性支氣管炎抗體(IBAb)水平。用純化的牛傳染性支氣管炎抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被抗原的微孔中依次加入傳染性支氣管

2、炎抗體(IBAb)，再與HRP標記的傳染性支氣管炎抗原結(jié)合，形成抗原抗體酶標抗原復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的傳染性支氣管炎抗體(IBAb)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中牛傳染性支氣管炎抗體(IBAb)濃度。試劑盒組成試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（4

3、8）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板14819628℃保存標準品：90pgml0.5ml1瓶0.5ml1瓶28℃保存標準品稀釋液1.5ml1瓶1.5ml1瓶28℃保存酶標試劑3ml1瓶6ml1瓶28℃保存樣品稀釋液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑A液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑B液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存終止液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存濃縮洗滌液（20ml20倍）1瓶（20ml30倍）1瓶28℃保存樣本處理及要

4、求樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固1020分鐘，離心20分鐘左右（20003000轉(zhuǎn)分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合1020分鐘后，離心20分鐘左右（20003000轉(zhuǎn)分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（20003000轉(zhuǎn)分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸

5、腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（20003000轉(zhuǎn)33各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)（n5）。5封板膜只限

6、一次性使用，以避免交叉污染。6底物請避光保存。7嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。計算：計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方