定量PCR儀熒光檢測(cè)系統(tǒng)研究.pdf

1、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)能在體外大量擴(kuò)增特定的DNA片段，自1985年發(fā)明以來(lái)在疾病診斷、藥物篩選、檢驗(yàn)檢疫等領(lǐng)域獲得了廣泛應(yīng)用，極大地推動(dòng)了分子生物學(xué)等相關(guān)學(xué)科的發(fā)展。定量PCR技術(shù)不僅能夠大量擴(kuò)增DNA，而且能實(shí)現(xiàn)對(duì)初始DNA模板的準(zhǔn)確定量，使得基因分析技術(shù)從原先粗放式的定性分析向精確的定量分析轉(zhuǎn)變，在臨床診斷及檢驗(yàn)檢疫等方面具有重要意義。熒光檢測(cè)系統(tǒng)通過監(jiān)測(cè)PCR進(jìn)程，將熒光信號(hào)實(shí)時(shí)轉(zhuǎn)換成電信號(hào)，經(jīng)分析與處理實(shí)現(xiàn)對(duì)DNA初始模板的定

2、量，是定量PCR儀實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確定量的核心部件之一。
　　 本文從熒光的發(fā)光原理、熒光特性及定量PCR的定量原理入手，通過對(duì)定量PCR實(shí)驗(yàn)中常用的熒光標(biāo)記物質(zhì)的發(fā)光原理、光譜特性等進(jìn)行分析和研究，針對(duì)定量PCR儀中熒光檢測(cè)的特殊應(yīng)用要求，結(jié)合熒光分析法中各種熒光的檢測(cè)手段，完成了熒光信號(hào)檢測(cè)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)和建立，實(shí)現(xiàn)了在單一激發(fā)光下對(duì)四種不同波長(zhǎng)段熒光信號(hào)的采集與處理。此外，對(duì)本文設(shè)計(jì)的熒光檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行了相關(guān)性能測(cè)試。實(shí)驗(yàn)表明，系統(tǒng)本底噪