大連沿岸海域倒卵形鰭藻與美國漸尖鰭藻的比較研究.pdf

1、腹瀉性貝類毒素(DSP)主要包括大田軟海綿酸(OA)及其天然衍生物鰭藻毒素(DTXs)，大環(huán)聚醚內(nèi)酯蛤毒素( PTXs)及其衍生物。鰭藻(Dinophysis)是腹瀉性貝類毒素的主要產(chǎn)毒藻種，是世界廣布種，我國沿海也有分布，但在自然海域鰭藻數(shù)量一般狀況下很少。雖然現(xiàn)今我國尚未有DSP中毒事件的報(bào)道，但沿海貝類感染DSP的情況嚴(yán)重，有關(guān)部門需要引起重視。本文選取大連近海海域分離的一株鰭藻，通過光學(xué)顯微鏡對其形態(tài)學(xué)信息進(jìn)行描述，采取分子生物

2、學(xué)方法分析其序列信息；運(yùn)用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(LC-MS/MS)對其產(chǎn)毒狀況及毒素組分進(jìn)行定性定量分析；并與美國株鰭藻進(jìn)行形態(tài)學(xué)、分子生物學(xué)及產(chǎn)毒的對比分析。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴從形態(tài)學(xué)分析上看，大連近海鰭藻細(xì)胞個(gè)體中等大小，長約53.8±2.0μm，寬約39.3±2.1μm，外形卵圓形，后體部寬大，細(xì)胞表面有很多網(wǎng)眼結(jié)構(gòu)；美國鰭藻細(xì)胞呈橢圓形，長約37.3±2.1μm，寬約24.8±2.1μm，下殼部漸尖，結(jié)合二者分子

3、生物學(xué)分析結(jié)果，鑒定大連近海鰭藻為倒卵形鰭藻(D.fortii)，美國鰭藻為漸尖鰭藻復(fù)合種(Dinophysis acuminata complex)。⑵通過溫度對大連近海倒卵形鰭藻生長影響的試驗(yàn)及LC-MS毒素分析，在8℃條件下其生長明顯受到抑制，在22℃條件下生長率達(dá)到最大；檢測得到其毒素組分為 OA、DTX1和PTX2，OA的平均含量為10.38~35.58 pg/cell，DTX1的平均含量為8.49~43.56 pg/cell

4、， PTX2的平均含量為91.18~171.16 pg/cell，低溫條件下（8℃）倒卵形鰭藻產(chǎn)生OA、DTX1和PTX2的含量顯著高于相對較高的兩個(gè)溫度（15℃和22℃）條件下的產(chǎn)毒量，并且在各溫度條件下，PTX2的含量均高于其他兩種毒素。倒卵形鰭藻細(xì)胞的生長對毒素的產(chǎn)生具有關(guān)鍵作用，其單位細(xì)胞各毒素組分含量隨細(xì)胞密度的降低而升高。⑶分別比較大連近海倒卵形鰭藻和美國漸尖鰭藻在三組溫度條件下的生長變化、產(chǎn)毒種類和含量變化。大連近海倒卵形

5、鰭藻和美國漸尖鰭藻分別在22℃和15℃達(dá)到各自最大生長率；兩種鰭藻的毒素組成相同，且大連近海倒卵形鰭藻各組分毒素含量均高于美國漸尖鰭藻。倒卵形鰭藻在8℃條件下各組分毒素含量明顯上升，22℃條件下美國漸尖鰭藻OA、DTX1毒素含量顯著升高。⑷大連近海海域倒卵形鰭藻可以產(chǎn)生OA、DTX1和PTX2毒素。溫度能夠影響大連近海倒卵形鰭藻的生長及產(chǎn)毒，且不同種鰭藻對溫度的適應(yīng)范圍不同、產(chǎn)毒也存在差異。以上研究是國內(nèi)首次對大連近海海域倒卵形鰭藻的生