藥用植物葡萄和石蒜中某些生物活性成分的測(cè)定.pdf

1、近年來(lái)，藥用植物資源日益受到人們的廣泛關(guān)注。藥用植物中生物活性成分的含量測(cè)定對(duì)從植物選育到中草(成)藥產(chǎn)品質(zhì)量及其臨床療效的評(píng)價(jià)等多個(gè)方面，既有經(jīng)濟(jì)意義同時(shí)更是關(guān)系到人們用藥安全和健康的大事。但由于藥用植物樣品基質(zhì)十分復(fù)雜，其中生物活性成分的含量測(cè)定較為困難。本文對(duì)葡萄和石蒜中某些生物活性成分的提取和含量測(cè)定進(jìn)行了研究，為這些植物資源的綜合利用和相關(guān)產(chǎn)品的質(zhì)量控制提供一定的技術(shù)手段和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 一、葡萄籽中白藜蘆醇含量的測(cè)定

2、 以乙酸乙酯為溶劑對(duì)葡萄籽中的白藜蘆醇進(jìn)行提取，直接進(jìn)行膠束電動(dòng)色譜(MEKC)分離并測(cè)定白藜蘆醇含量。對(duì)葡萄籽中的白藜蘆醇，采用乙酸乙酯為溶劑經(jīng)索氏提取4 hr可一次性提取完全。優(yōu)化后的膠束電動(dòng)色譜緩沖液組成為25mM硼砂溶液(pH 9.0)，其中含有25 mM十二烷基硫酸鈉(SDS)和2.5 mM β-環(huán)糊精硫酸鈉(SCD)。該方法對(duì)白藜蘆醇的檢出限為23.1 ng，加標(biāo)回收率在92％-95％范圍內(nèi)。此方法有效地使樣品制備技術(shù)液

3、相萃取和高效分離技術(shù)膠束電動(dòng)色譜聯(lián)系起來(lái)。由于萃取后的有機(jī)相可以直接用于膠束電動(dòng)色譜進(jìn)樣分離測(cè)定，既減少了樣品基質(zhì)的干擾，濃縮了分析物，又簡(jiǎn)化了分析手續(xù)。方法具有相對(duì)簡(jiǎn)便、快速、靈敏度高的特點(diǎn)。此方法間或可用于其他植物種子及提取物中的白藜蘆醇含量測(cè)定。 二、葡萄中谷胱甘肽含量的測(cè)定 以鄰苯二甲醛(OPA)為衍生化試劑衍生谷胱甘肽(GSH)，衍生產(chǎn)物提高了對(duì)GSH的熒光檢測(cè)靈敏度。優(yōu)化并建立了測(cè)定葡萄中谷胱甘肽的毛細(xì)管電泳

4、-熒光檢測(cè)方法。優(yōu)化的電泳分離條件為：分離電壓：25 kV，背景電解質(zhì)：300 mM硼砂緩沖液(pH 8.0)。熒光檢測(cè)激發(fā)波長(zhǎng)為340 nm和發(fā)射波長(zhǎng)為420 nm。上述方法工作曲線的線性回歸方程為y=5.9673x+0.7822，相關(guān)系數(shù)為0.9998。且加標(biāo)回收率較好。此方法可以用于葡萄中谷胱甘肽的含量測(cè)定以及葡萄飲料中谷胱甘肽質(zhì)量控制。 三、石蒜中加蘭他敏和力可拉敏的提取、定量分析方法比較 探索了從石蒜中索氏提取

5、加蘭他敏和力可拉敏的實(shí)驗(yàn)條件，確定了以甲醇為提取溶劑，于85℃下索氏提取3小時(shí)的樣品制備方法。優(yōu)化并建立了測(cè)定石蒜中加蘭他敏和力可拉敏的含量的高效液相色譜法(HPLC)和毛細(xì)管區(qū)帶電泳法(CZE)。高效液相色譜的流動(dòng)相為磷酸鹽緩沖液-甲醇-乙腈(92.5:5:2.5，v/v/v)，流動(dòng)相流速為1.0 mL/min。毛細(xì)管區(qū)帶電泳的分離電壓為20 kV，背景電解質(zhì)為50 mM磷酸緩沖液(pH 5.0)中加入10％乙腈溶液。檢測(cè)波長(zhǎng)均為21