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1、量子點(diǎn)具有很多優(yōu)異的性質(zhì),如紫外吸收范圍寬;熒光激發(fā)范圍寬而連續(xù);熒光發(fā)射峰峰形對(duì)稱,半峰寬窄;熒光發(fā)射波長(zhǎng)可調(diào);抗熒光漂白能力強(qiáng);熒光壽命比有機(jī)熒光染料長(zhǎng);量子產(chǎn)率較高等。近年來,作為一種新型的熒光生物探針,量子點(diǎn)在生物分子和多色標(biāo)記、生物組織和細(xì)胞的標(biāo)記成像、免疫分析以及疾病診斷等領(lǐng)域的研究中取得了很大的進(jìn)展。本項(xiàng)研究在水溶性CdTe/CdS量子點(diǎn)的合成及其作為生物探針對(duì)胰蛋白酶測(cè)定和細(xì)胞標(biāo)記的應(yīng)用研究方面做了一系列工作,得到一些創(chuàng)
2、新性結(jié)果,主要內(nèi)容如下:
首先提出用半胱氨酸作修飾劑,常見無機(jī)試劑為反應(yīng)原料,將水浴法和水熱法結(jié)合制備CdTe/CdS量子點(diǎn)的新方法。此法兼?zhèn)渌》ê退疅岱ǖ膬?yōu)點(diǎn),合成周期短,條件溫和,量子產(chǎn)率高。通過控制不同的條件合成出熒光發(fā)射波長(zhǎng)分布范圍寬(500~625 nm)的水溶性CdTe/CdS量子點(diǎn)。光學(xué)性能表征證明量子點(diǎn)的核殼結(jié)構(gòu),具備半峰寬窄、峰形對(duì)稱等優(yōu)異的光譜性能;結(jié)構(gòu)性能表征表明量子點(diǎn)尺寸分布均勻,為近似球形顆粒。
3、同時(shí)研究pH值、加熱溫度、加熱時(shí)間等對(duì)晶體生長(zhǎng)的影響。
其次,實(shí)驗(yàn)中對(duì)合成的量子點(diǎn)進(jìn)行透析純化,后利用外層包被的半胱氨酸的羧基實(shí)現(xiàn)了與胰蛋白酶的共價(jià)鏈接,鏈接后量子點(diǎn)的熒光強(qiáng)度明顯增強(qiáng),當(dāng)胰蛋白酶濃度在0.02~50.0 mg/L范圍內(nèi)時(shí),量子點(diǎn)熒光強(qiáng)度的變化與胰蛋白酶濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。線性方程為:△I=17.86+8.87 c(mg/L),相關(guān)系數(shù)為r=0.9993,檢出限為3μg/L。對(duì)濃度為33.3 mg/L的
4、胰蛋白酶標(biāo)準(zhǔn)溶液平行測(cè)定11次,得到的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.78%。此法簡(jiǎn)便,快速,樣品不需要復(fù)雜的前處理,結(jié)果令人滿意。
最后,基于與上述生物大分子的作用規(guī)律,利用量子點(diǎn)表面的羧基與抗體分子中氨基之間的作用,實(shí)現(xiàn)了CdTe/CdS量子點(diǎn)與兔抗人CEACAM8(CD67)抗體的共價(jià)結(jié)合,通過抗原-抗體之間的特異性反應(yīng),采用直接標(biāo)記法成功地對(duì)宮頸癌上皮細(xì)胞HeLa細(xì)胞進(jìn)行免疫標(biāo)記與成像。結(jié)果表明,通過直接標(biāo)記法可以成功實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞
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