基于納米材料熒光檢測生物分子的研究.pdf

1、納米金和氧化石墨烯作為目前新興的兩種重要的納米材料，在實(shí)際生活中各個領(lǐng)域的應(yīng)用越來越廣泛，特別是在生命科學(xué)、藥物分析中的應(yīng)用。兩種納米材料均有著自身優(yōu)良的特性及作為納米材料的特性，為生物傳感器的構(gòu)建提供條件。核酸適配體對靶物質(zhì)的高特異識別能力和高親和力，為檢測物質(zhì)消除干擾，且可進(jìn)行功能化修飾在納米金或者氧化石墨烯上用來制備核酸適配體傳感器。熒光探針是指利用熒光信號與目標(biāo)物的濃度存在關(guān)系,通過觀察熒光強(qiáng)度的變化來檢測靶物質(zhì)。本論文通過構(gòu)建

2、不同機(jī)理的熒光探針檢測生物小分子物質(zhì)包括腺苷、多巴胺以及卡那霉素。由此方法構(gòu)建的熒光探針檢測簡便，具備高靈敏度、高選擇性。
　　(1)第一章介紹了以下內(nèi)容：納米金和氧化石墨烯的性質(zhì)特征、制備方法以及應(yīng)用研究；核酸適配體的制備及應(yīng)用；熒光傳感器的機(jī)理分析；本論文的研究意義及主要研究內(nèi)容。
　　(2)基于納米金和氧化石墨烯構(gòu)建的熒光探針檢測溶液中的分析物質(zhì)。在本實(shí)驗(yàn)中，腺苷適配體可通過Au-S鍵修飾在納米金表面，無靶物質(zhì)腺苷時，

3、納米金-適配體可通過π-π堆疊作用吸附在氧化石墨烯表面，納米金-適配體-氧化石墨烯的復(fù)合物沉淀將會生成；在靶物質(zhì)腺苷存在時，納米金-適配體會存在于上清液中，不會全部與氧化石墨烯形成沉淀。加入熒光素，無靶物質(zhì)腺苷的上清液熒光較強(qiáng)，有靶物質(zhì)腺苷的上清液熒光較弱。通過檢測熒光的強(qiáng)度，不同濃度的腺苷可被檢測。線性范圍5×10-8M到5×10-7M，檢出限為5.8×10-9M。這個熒光探針對腺苷的檢測特異性強(qiáng)，其他類似物均無明顯干擾。并且此熒光探

4、針對于實(shí)際樣品中的腺苷檢測具有重要的意義。
　　(3)基于氨基芘和氧化石墨烯構(gòu)建的熒光探針檢測多巴胺。在無多巴胺存在時，熒光物質(zhì)氨基芘的熒光可被熒光淬滅劑氧化石墨烯淬滅，主要是通過氨基芘與氧化石墨烯之間的π-π堆疊作用。在多巴胺存在時，多巴胺將會吸附在氧化石墨烯的表面，使氨基芘從其表面析出。由于多巴胺與氧化石墨烯之間的強(qiáng)吸附作用，這個熒光探針具有較好的靈敏度和選擇性。線性范圍為4×10-9M to4×10-7M，檢出限為7.53n

5、M。本實(shí)驗(yàn)探討了氧化石墨烯與適配體對多巴胺的吸附作用，手段為熒光光譜、紅外光譜、以及朗繆爾吸附理論分析。可知氧化石墨烯對多巴胺有更強(qiáng)的吸附作用，因此兩者的強(qiáng)吸附作用使該熒光探針可對樣品中多巴胺進(jìn)行檢測。
　　(4)基于陽離子體熒光產(chǎn)物、適配體、氧化石墨烯及DNA酶的相互作用檢測靶物質(zhì)卡那霉素。陽離子體熒光產(chǎn)物在加入適配體時熒光淬滅，加入氧化石墨烯，熒光進(jìn)一步淬滅，當(dāng)加入靶物質(zhì)卡那霉素和DNA酶時，帶有陽離子熒光物質(zhì)的適配體從氧化石