玉米抗氧化肽的制備及其應(yīng)用研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)以玉米蛋白為原料，研究了制備具有強(qiáng)抗氧化性玉米蛋白水解物的最佳水解條件，玉米抗氧化肽的膜分離方式、在生肉糜中對(duì)脂肪氧化的抑制作用及其在胃癌SGC-7901細(xì)胞體系的抗氧化活性。
　　首先，實(shí)驗(yàn)采用Alcalase堿性蛋白酶制備玉米抗氧化多肽，研究pH值、蛋白溶液的濃度、反應(yīng)時(shí)間、酶用量、溫度等條件對(duì)抗氧化活性的影響。然后通過(guò)與抗壞血酸的抗氧化能力相比較，實(shí)驗(yàn)對(duì)玉米肽的還原力及對(duì)DPPH自由基、超氧陰離子自由基清除能力和Fe2

2、+金屬螯合能力進(jìn)行測(cè)定，將所制備的玉米蛋白多肽利用超濾法分離純化，將8 h水解物按分子量范圍分成了4段，分別是H1(MW>10 kDa)，H2(5~10 kDa)，H3(1~5 kDa)和H4(MW<1 kDa)。結(jié)果表明，最佳制備條件是：底物濃度9％、pH值8.0、酶用量(E/S)3%、溫度50℃、水解時(shí)間為8 h；水解物具有較好的還原能力、自由基清除能力和鐵離子螯合能力；純化后分子量在1~5 kDa(H3)肽段的自由基清除能力最高。

3、結(jié)果表明，玉米肽具有一定的抗氧化能力，但是抗氧化效果不及抗壞血酸。
　　添加1.0%、1.5%、2.0%的玉米蛋白水解物于生肉糜中，在儲(chǔ)存過(guò)程中測(cè)定生肉糜的TBARS值、紅度值、pH值，并找8位評(píng)定人員對(duì)感官指標(biāo)進(jìn)行評(píng)定。結(jié)果表明：玉米蛋白水解物在7d內(nèi)能抑制生肉糜氧化酸敗，保護(hù)肉糜色澤。為了進(jìn)行比較，將未水解的玉米蛋白（添加量2.0%）和BHA（添加量0.02%）添加到肉糜中作為對(duì)照，結(jié)果表明，玉米蛋白水解物處理組對(duì)脂肪氧化的抑

4、制效果要好于添加未水解物組，但不如陽(yáng)性對(duì)照BHA組的效果好，感官評(píng)定結(jié)果與之相似。
　　研究了玉米抗氧化肽段H3(1~5 kDa)劑量對(duì)氧化損傷胃癌細(xì)胞SGC-7901的保護(hù)作用。將實(shí)驗(yàn)分為5組：空白對(duì)照組；H2O2模型陰性對(duì)照組；H2O2+H3低劑量組（20μg/mL）；H2O2+H3中劑量組（40μg/mL）；H2O2+H3高劑量組（80μg/mL）。實(shí)驗(yàn)測(cè)定了細(xì)胞存活率、乳酸脫氫酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘

5、肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、過(guò)氧化氫酶（CAT）活力和丙二醛（MDA）含量的變化，并通過(guò)熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀檢測(cè)了細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果表明，與模型陰性對(duì)照組相比，中、高劑量組的玉米抗氧化肽H3能顯著提高胃癌細(xì)胞CAT、SOD和GSH-Px 活性及存活率；且明顯降低了MDA含量和LDH酶活力。其中80μg/mL的高劑量處理組細(xì)胞存活率達(dá)到了47.10%，SOD、CAT和GSH-Px酶活力分別為45.50、35.10和34.13