固載表面毛細流定向組裝成環(huán)技術及其在生化藥物分析中的應用研究.pdf

1、西南師范大學博士學位論文固載表面毛細流定向組裝成環(huán)技術及其在生化藥物分析中的應用研究姓名：劉穎申請學位級別：博士專業(yè)：分析化學指導教師：黃承志20040601固載裹面毛細流定向組裝成環(huán)技術及其在生化藥物分析中的應用研究自組裝熒光環(huán)，實現(xiàn)了對四環(huán)素的定量分析，方法的檢測限為85fmol(020l液滴)，成功地應用于口服藥及合成樣分析。該方法具有背景干擾小、耗樣量少及對環(huán)境和分析工作者無損壞作用等特點。盡管在Tri爭HCI(pH520)酸性

2、條件下，四環(huán)素的熒光較弱，但當加入一定量的砧“之后，四環(huán)素(TQ與烈“生成的配合物熒光增強，且最大激發(fā)波長為380Bin，最大發(fā)射波長為498nm。實驗表明，將TCA13復合物滴加在疏水處理的載玻片上時，經(jīng)過環(huán)直徑的配合物最大熒光強度正比于四環(huán)素的濃度。當點樣體積為010l時，四環(huán)素的線性范圍為75～8000fmol(或79。8000x108M)，檢測限達到O8fmol(或79x104M)。比四環(huán)素自身SOR法靈敏度提高6倍以上。用本法

3、實測了藥片、膠囊、尿液和牛奶中的四環(huán)素，回收率在970—1065％。該方法對人體組織、血清、尿液和食用食品中四環(huán)素殘留量的測定提供了可行的分析方法。試驗發(fā)現(xiàn)，在SOR技術中采用烘箱干燥小液滴存在烘干時間較長、相鄰較近的液滴之間由于受熱不勻而導致液滴蒸發(fā)時溶劑揮發(fā)速度不同，環(huán)線上溶質(zhì)分布有時不是十分均勻，使處理數(shù)據(jù)時間拖長等不足。本文以鎮(zhèn)痛藥羥甲香豆素和熒光素為分析物，研究了微波加熱條件，并初步探討了不同加熱方式對成環(huán)的影響。在六氫吡啶溶

4、液中羥甲香豆素的激發(fā)波長為363rim，發(fā)射波長約為447nm。將含有羥甲香豆素的六氫吡啶和PVA124的混合溶液滴在由二氯二甲基硅烷處理的載玻片上，在微波爐高火檔加熱15min后，羥甲香豆素可以形成毫米大小的自組裝環(huán)，且環(huán)線上溶質(zhì)分布十分均勻，熒光強度比烘箱干燥時明顯增強，環(huán)線寬更窄。由于其熒光可以被苦味酸猝滅，猝滅程度與苦味酸的濃度成正比，由此建立了測定苦味酸的SOR分析方法。當點樣體積為O10山時，苦味酸線性響應為3050OxlO

5、14mol，檢測限達到30fmol，與液相熒光法相比，靈敏度顯著提高。用于水樣、無機和有機合成樣中痕量苦味酸的測定，回收率在970～1060％，RSD為2肚35％。本方法在臨床藥物分析、生命科學、環(huán)境檢測等領域具有重要意義。同樣，當使用微波爐加熱，熒光顯微分析表明飛摩爾量熒光素鈉可以在DMCS處理的載玻片上形成綠色熒光環(huán)，其外半徑小于060mm，環(huán)帶寬約為0024mm。當點樣體積為010山時，熒光素鈉的線性范圍在06～1200飛摩爾f或

6、62～12000nM)，檢測限達到620阿摩爾(或06nM)。用本法測定了熒光素鈉注射液中的熒光素鈉，回收率在950—105O％，相對標準偏差分別為35％和42％。建立了簡單、高靈敏、快速的測定探針藥物的SOR分析方法?；蚬こ碳夹g的一個主要方向是利用重組DNA技術生產(chǎn)蛋白藥物，因此，對核酸結構和功能研究對有效設計和合成新藥具有重要意義。試驗發(fā)現(xiàn)，在pH754(TrisHCI)溶液中，Hoechst33258可以與A—DNA形成復合物，